DB13/T 2456-2017 番茄苗期抗黄化曲叶病毒基因快速检测技术规程

ICS67.080.01

B31

DB13

河北省地方标准

DB13/T2456—2017

番茄苗期抗黄化曲叶病

毒基因快速检测技术规程

2017-03-29发布2017-06-01实施

河北省质量技术监督局发布

DB13/T2456—2017

前言

本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。

本标准由河北省农林科学院提出。

本标准起草单位：河北省农林科学院经济作物研究所。

本标准主要起草人：吴志明、李亚栋、耿保进、高慧敏、田玉、孙英焘、孙世卫、寇慧苹、冯贺

敬。

I

DB13/T2456—2017

番茄苗期抗黄化曲叶病毒基因快速检测技术规程

1范围

本标准规定了番茄苗期抗黄化曲叶病毒基因的检测前准备和检测技术。

本标准适用于番茄苗期抗黄化曲叶病毒基因Ty-1、Ty-2、Ty-3/3a的分子快速检测。

2术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

2.1

番茄黄化曲叶病毒病（Tomatoyellowleafcurlvirusdisease）

为病毒性病害，病原为番茄黄化曲叶病毒（Tomatoyellowleafcurlvirus,TYLCVorTY），

病原特征及发病症状见附录C。

2.2

番茄抗黄化曲叶病毒基因

2.2.1

番茄抗黄化曲叶病毒基因Ty-1

定位在番茄第6号染色体上(基因号)。

2.2.2

番茄抗黄化曲叶病毒基因Ty-2

定位在番茄第11号染色体上。

2.2.3

番茄抗黄化曲叶病毒基因Ty-3/3a

定位在番茄第6号染色体上。

3检测前准备

3.1检测仪器

组织研磨仪、恒温水浴锅、离心机、高压灭菌锅、移液器、称量天平、冰箱(4℃、-20℃、-80℃)、

电泳仪、紫外凝胶成像仪、PCR仪等。

3.2检测试剂

DNA提取液(CTAB)、氯仿/异戊醇(24/1)、乙醇、异丙醇、蒸馏水、双蒸馏水（ddH2O）、TE缓冲液

(Ph=8.0)、50xTAE缓冲液、Goldview、DM2000、琼脂糖、Taq酶等。

3.3检测引物

1

DB13/T2456—2017

表1给出了抗TYLCV的抗病基因扩增引物。

表1Ty-1、Ty-2和Ty-3/3a检测引物

基因染色体引物序列(5′-3′)扩增产物(bp)标记类型

Ty1正向TGTATGCGTCGTGTTAGAAGGTC

Ty1反向AATGGTGACAGAATCAAGATCCAC

Ty-16984（抗）1434（感）