DB32/T 4000-2021 牛结核病诊断技术(γ-干扰素体外ELISA法)

ICS11.220

CCSB41

DB32

江苏省地方标准

DB32/T4000—2021

牛结核病诊断技术（γ-干扰素体外ELISA

法）

DiagnosticTechniqueforBovineTuberculosisbyInterferon-gammaELISAAssay

2021-02-03发布2021-03-03实施

江苏省市场监督管理局发布

DB32/T4000-2021

目次

前言..............................................................................Ⅱ

1范围...............................................................................1

2规范性引用文件.....................................................................1

3术语和定义.........................................................................1

4原理...............................................................................2

5试剂及仪器.........................................................................2

6检测方法...........................................................................2

7质量控制...........................................................................3

8结果判定...........................................................................4

9安全措施...........................................................................4

附录A（资料性）外周抗凝血培养所需材料..............................................5

附录B（资料性）夹心ELISA所需试剂和材料............................................6

附录C（资料性）检测所需仪器........................................................7

附录D（规范性）检测所用试剂的配制..................................................8

I

DB32/T4000-2021

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起

草。

本文件由扬州大学提出。

本文件由江苏省畜牧业标准化技术委员会归口。

本文件起草单位：扬州大学、江苏省动物疫病预防控制中心。

本文件主要起草人：焦新安、陈祥、徐正中、潘志明、陈昌海、殷月兰。

II

DB32/T4000-2021

牛结核病诊断技术（γ-干扰素体外ELISA法）

1范围

本文件规定了牛结核病诊断技术（γ-干扰素体外ELISA法）的试剂及仪器、检测方法、质量控制和

结果判定等。

本文件适用于牛结核病诊断。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

GB/T18645动物结核病诊断技术

GB19489实验室生物安全通用要求

GB/T32945牛结核病诊断体外检测γ干扰素法

3术语和定义

本文件没有特别需要界定的术语和定义。

4原理

感染牛分枝杆菌的牛，其T淋巴细胞已被牛分枝杆菌致敏并产生免疫记忆。当体外再次遇到牛分枝

杆菌特异性抗原（结核菌素）刺激时，牛外周血中淋巴细胞被激活并大量释放γ-干扰素，而未被感染的

牛则不会分泌或低水平分泌γ-干扰素。通过双单克隆抗体夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）检测特异性

γ-干扰素浓度水平，即可诊断牛结核病。

5试剂及仪器

5.1试剂

外周抗凝血培养所需材料参见附录A。夹心ELISA所需试剂和材料参见附录B。

5.2仪器

检测所需仪器参见附录C。

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