GB/T 23743-2009 饲料中凝固酶阳性葡萄球菌的微生物学检验 Baird-Parker琼脂培养基计数法

犐犆犛６５．１２０

犅４６

中华人民共和国国家标准

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犌犅犜２３７４３２００９

饲料中凝固酶阳性葡萄球菌的微生物学

检验犅犪犻狉犱犘犪狉犽犲狉

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琼脂培养基计数法

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ＩＳＯ６８８８１１９９９ＡＭＤ．１２００３Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｏｆｆｏｏｄａｎｄａｎｉｍａｌ

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Ａｍｅｎｄｍｅｎｔ１ＩｎｃｌｕｓｉｏｎｏｆｒｅｃｉｓｉｏｎｄａｔａＭＯＤ

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２００９０５１２发布２００９０９０１实施

中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局

发布

中国国家标准化管理委员会

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前言

本标准修改采用：／：《食品和饲料微生物学凝固酶阳性葡萄球菌（金

ＩＳＯ６８８８１１９９９ＡＭＤ．１２００３

黄色葡萄球菌及其他种）的平行计数方法第部分：琼脂培养基法修订：包含精密

１ＢａｉｒｄＰａｒｋｅｒ１

度》（英文版）。

本标准根据：／：重新起草。除删除了前言和参考文献外，本标准的顺

ＩＳＯ６８８８１１９９９ＡＭＤ．１２００３

序编号与：／：完全一样。

ＩＳＯ６８８８１１９９９ＡＭＤ．１２００３

ＩＳＯ６８８８的三个部分是平行的三个方法，本标准只规定了ＢａｉｒｄＰａｒｋｅｒ琼脂培养基法。

考虑到本标准的适用范围和我国对标准编写的具体要求，在采用：／：

ＩＳＯ６８８８１１９９９ＡＭＤ．１２００３

时，本标准作了一些编辑性修改。由于：／：的范围是食品和饲料，本标准

ＩＳＯ６８８８１１９９９ＡＭＤ．１２００３

删除了仅涉及食品的部分内容。有关技术性差异已编入正文中并在它们所涉及的条款的页边空白处用

垂直单线标识。在附录中给出了这些技术性差异及其原因的一览表以供参考。

Ａ

为了便于使用，对于：／：还作了下列编辑性修改：

ＩＳＯ６８８８１１９９９ＡＭＤ．１２００３

ａ）“本国际标准”一词改为“本标准”；

ｂ）“稀释液和培养基”中的表格改为文字描述；

）用小数点“”代替作为小数点的“，”；

ｃ．

ｄ）正文中的公式增加序号。

本标准的附录为资料性附录。

Ａ

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本标准由全国饲料工业标准化技术委员会（／）提出并归口。

ＳＡＣＴＣ７６

本标准起草单位：中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所［国家饲料质量监督检验中心

（北京）］。

本标准主要起草人：饶正华、李丽蓓、马东霞、张苏、苏晓鸥。

Ⅰ

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饲料中凝固酶阳性葡萄球菌的微生物学

检验犅犪犻狉犱犘犪狉犽犲狉

琼脂培养基计数法

１范围

本标准规定了凝固酶阳性葡萄球菌在固体培养基（培养基）上、好氧条件

ＢａｉｒｄＰａｒｋｅｒ３６℃±１℃

下培养后进行菌落计数的技术要求。

本标准适用于饲料中凝固酶阳性葡萄球菌的检测。

２规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有

的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究

是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。

／食品卫生微生物学检验总则

ＧＢＴ４７８９．１

／饲料采样（／—，：，）

ＧＢＴ１４６９９．１ＧＢＴ１４６９９．１２００５ＩＳＯ６４９７２００２ＩＤＴ

／动物饲料试样的制备（／—，：，）

ＧＢＴ２０１９５ＧＢＴ２０１９５２００６ＩＳＯ６４９８１９９８ＩＤＴ

测试方法与结果的准确度（正确度与精密度）第部分：确定标准测试方法重复性

ＩＳＯ５７２５２２

和可再现性的基本方法

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ＩＳＯ１６１４０食品和动物饲料微生物学替代方法确认草案

３术语和定义

下列术语和定义适用于本标准。

３．１

凝固酶阳性葡萄球菌犮狅犪狌犾犪狊犲狅狊犻狋犻狏犲狊狋犪犺犾狅犮狅犮犮犻

犵狆狆狔

在本标准规定的检验条件下，在选择性固体培养基中培养可形成典型或／和非典型菌落且血浆凝固

酶试验为阳性的一群细菌。

３．２

凝固酶阳性葡萄球菌的计数犲狀狌犿犲狉犪狋犻狅狀狅犳犮狅犪狌犾犪狊犲狅狊犻狋犻狏犲狊狋犪犺犾狅犮狅犮犮犻

犵狆狆狔

按本标准规定的方法，每毫升或每克试样中凝固酶阳性葡萄球菌的数量。

４原理

４．１用表面接种法在固体选择性培养基上进行定量接种，同时接种两个平皿。液体样品直接接种，其

他样品需用１∶１０稀释液接种。

在其他稀释度，同上法用稀释液接种。每个稀释度接种两个平皿。

培养皿在好氧培养，在培养和时均要进行检查。

４．２３６℃±１℃２４ｈ４８ｈ

４．３选择合适的稀释度水平，数平皿中生长的菌落数，计算每克（每毫升）样品中含有凝固酶阳性葡萄

球菌的数量。

５稀释液和培养基

５．１总则

除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂，实验室用水采用蒸馏水或去离子水或相当纯

１

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度的水。

５．２稀释液

生理盐水：

氯化钠８．５

ｇ

水１０００ｍＬ

溶解后，分装到加有玻璃珠的锥形瓶内，每瓶，灭菌。

２２５ｍＬ１２１℃１５ｍｉｎ

５．３犅犪犻狉犱犘犪狉犽犲狉琼脂培养基

注：可以使用商品培养基。使用时，严格按照使用说明操作。

５．３．１基础培养基

５．３．１．１成分

胰蛋白胨１０．０ｇ

酵母膏１．０ｇ

肉膏５．０ｇ

丙酮酸钠１０．０ｇ

Ｌ甘氨酸１２．０ｇ

氯化锂５．０ｇ

琼脂１２２２１

ｇ～ｇ

水终体积为１０００ｍＬ

５．３．１．２制备

将上述成分煮沸溶解，商品基础培养基则按使用说明配制。必要时校正ｐＨ，使培养基灭菌后在

下为。然后分装到三角瓶或其他合适的容器中。灭菌。

２５℃Ｈ７．２±０．２１００ｍＬ１２１℃１５ｍｉｎ

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５．３．２溶液

５．３．２．１亚碲酸钾溶液

５．３．２．１．１成分

亚碲酸钾２（）

Ｋ２ＴｅＯ３１．０ｇ

水１００ｍＬ

５．３．２．１．２制备

稍微加热，使亚碲酸钾在水中完全溶解。

亚碲酸钾应当是易溶的，如果在水中有白色不溶物，此试剂不可再用。

用０．２２ｍ的滤膜过滤除菌。

μ

此溶液在３℃±２℃最多可保存一个月。

溶液中形成白色沉淀时，应弃之不用。

５．３．２．２卵黄乳液

浓度约为２０％或遵照厂家规定。

注：可使用商品培养基。