DB22/T 3440-2023 人粪便中华支睾吸虫虫卵检测 PCR和实时荧光PCR法

ICS07.00.01

CCSC62

22

吉林省地方标准

DB22/T3440—2023

人粪便中华支睾吸虫虫卵检测PCR和实

时荧光PCR法

DetectionofClonorchissinensiseggsinhumanfeces-PCRandrealtimePCR

methods

2023-01-13发布2023-03-01实施

吉林省市场监督管理厅发布

DB22/T3440—2023

目次

前言...........................................................................II

1范围................................................................................1

2规范性引用文件......................................................................1

3术语和定义..........................................................................1

4缩略语..............................................................................1

5试剂、材料和引物....................................................................1

试剂............................................................................1

材料............................................................................2

引物............................................................................2

6仪器和设备..........................................................................2

7样品采集............................................................................3

8核酸提取............................................................................3

9DNA的浓度和纯度测定................................................................3

10PCR检测...........................................................................4

普通PCR检测..................................................................4

实时荧光PCR检测..............................................................5

附录A（资料性）试剂配制........................................................6

附录B（规范性）华支睾吸虫虫卵特定的DNA序列....................................7

I

DB22/T3440—2023

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由长春海关提出并归口。

本文件起草单位：吉林国际旅行卫生保健中心（长春海关口岸门诊部）、长春海关技术中心。

本文件主要起草人：马文晨、孟庆峰、赵大力、王玮琳、刘金华、孟日增、王伟利。

II

DB22/T3440—2023

人粪便中华支睾吸虫虫卵检测PCR和实时荧光PCR法

1范围

本文件规定了人粪便中华支睾吸虫虫卵PCR和实时荧光PCR法的试剂、材料和引物，仪器和设备，样

品采集，核酸提取，DNA的浓度和纯度测定，检测方法和结果判定。

本文件适用于人粪便中华支睾吸虫虫卵核酸检测。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4缩略语

下列缩略语适用于本文件。

bp：碱基对（basepair）

CTAB：十六烷基三甲基溴化铵（cetyltrithylammoniumbromide）

DNA：脱氧核糖核酸（deoxyribonucleicacid）

dNTP：脱氧核苷酸三磷酸（deoxyribonucleosidetriphosphate）

EDTA：乙二胺四乙酸（ethylenediaminetetraaceticacid）

FAM：6-羧基荧光素(6-carboxyfluorescein)

OD：光密度值（opticaldensity）

PCR：聚合酶链式反应（polymerasechainreaction）

Taq酶：DNA聚合酶（thermusaquaticu）

TE缓冲液：Tris-HCl、EDTA缓冲液（Tris-EDTA