DB37/T 1019-2008 大豆及其制品中抗草甘膦转基因成分的实时荧光定量PCR检测方法

ICS67.050

X04

DB37

山东省地方标准

DB37/T1019－2008

大豆及其制品中抗草甘膦转基因成分的

实时荧光定量PCR检测方法

QuantitativeDetectionforGiyphosate-resistantGeneticallyModified

IngredientSoybeanProductsbyRealTimeFluorescencePCRMethod

2008-XX-XX发布2008-09-01实施

山东省质量技术监督局发布

DB37/T1019－2008

前言

本标准由山东省质量技术监督局提出。

本标准由山东食品标准化技术委员会归口。

本标准起草单位：山东省农业管理干部学院、山东省标准化研究院、暨南大学。

本标准主要起草人：白卫滨、孙建霞、刘冠军、黄亚东、姜桂传、于克学。

I

DB37/T1019－2008

大豆及其制品中抗草甘膦转基因成分的实时荧光定量PCR检测方法

1范围

本标准规定了大豆制品中转基因成分的实时荧光定量PCR检测方法。

本标准适用于转基因大豆RoundupReady及其衍生品种，以及制品中抗草甘膦转基因成分的定量

PCR检测。

本标准的定量检测限为0.1%。

2规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的

修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究

是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。

GB/T19495.1-2004转基因产品检测通用要求和定义

GB/T19495.2-2004转基因产品检测实验室技术要求

GB/T19495.3-2004转基因产品检测核酸提取纯化方法

GB/T19495.7-2004转基因产品检测抽样和制样方法

3术语、定义和缩略语

本标准采用下列术语、定义和缩略语。更多的定义、术语和缩略语，可参见GB/T19495.1-2004《转

基因产品检测通用要求和定义》。

3.1术语和定义

下列术语和定义适用于本标准。

3.1.1

内源基因endogenousreferencegene

在转基因作物基因组中拷贝数恒定的、不显示等位基因变化的、在其他品种作物中不存在的基因。

该基因即可用于评价样品中是否存在该作物品种，也可作为参照基因序列对某一目的基因进行定量检

测，同时还可确定DNA提取是否成功、并验证荧光PCR反应体系中是否存在抑制物质。

3.1.2

外源基因exogenousgene

利用生物工程技术转入其它生物基因，使该生物品种表现新的生物学特性。

3.1.3

标准品standardsubstance

由认可机构制备、有溯源性的并经检测证实含有不同浓度目标序列的物质。

3.2缩略语

下列缩略语适用于本标准。

3.2.1

Lectin

植物凝集素，为大豆本身含有的内源基因。

1

DB37/T1019－2008

3.2.2

CaMV35S

35Spromoterfromcauliflowermosaicvirus,来自于花椰菜花叶病毒的35S启动子。

3.2.3

EPSPS

5-enolpyruvylshikimate-3-phosphatesynthasegene,5-莽草酸-3-磷酸合成酶基因。

3.2.4

35S/EPSPS

花椰菜花叶病毒的35S启动子和5-莽草酸-3-磷酸合成酶基因的结构基因。

3.2.5

Ct

C代表Cycle,t代表threshold,Ct值的含义是：每个反应管内的荧光信号到达设定的阈值时所

经历的循环数。

3.2.6

PCR

Polymerasechainreaction,即聚合酶链式反应：以耐热DNA聚合酶和一对引物（与待测的目标

核酸分子序列同源的DNA片段）通过高温（DNA分子变性）和低温（引物和目标核酸分子复性并被耐热

DNA聚合酶延伸）的交替循环扩增待测的目标核酸分子的方法。

3.2.7

实时荧光定量PCR

荧光定量PCR技术，是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监控整个PCR

进程，最后通过标准曲线对未知模版进行定量分析的方法。

4防污染措施

大豆制品中转基因成分的实时荧光定量PCR检测过程中的防污染措施按GB/T