T/CAICC 04-2021 蔬菜水果中克百威的快速检测 胶体金免疫层析法

范围:本方法规定了蔬菜水果中克百威的胶体金免疫层析快速检测方法。 本方法适用于除大蒜、芒果外的蔬菜水果中克百威的快速测定; 主要技术内容:3原理本方法采用竞争抑制免疫层析原理。样品中的克百威经提取后与胶体金标记的特异性抗体结合，抑制了抗体和试纸条中检测线（T线）上抗原的结合，从而导致检测线颜色深浅的变化。通过检测线与质控线（C线）颜色深浅比较，对样品中克百威进行定性判定。4试剂与材料4.1试剂除另有说明外，所有试剂均为分析纯，实验室用水应符合GB/T 6682中二级水的要求。4.1.1甲醇（CH3OH）。4.1.2提取液：由胶体金免疫层析试纸条配套提供，或按照其说明书配制。4.1.3参考物质：克百威参考物质的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子质量见表1，纯度≥98%。表1克百威参考物质的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子质量中文名称英文名称CAS登录号分子式相对分子质量克百威Carbofuran1563-66-2C12H15NO3221.25注：或等同可溯源物质。4.2溶液配制4.2.1克百威标准储备液（100 μg/mL）：准确称取克百威参考物质（4.1.3）1 mg，置于10 mL容量瓶中，用甲醇（4.1.1）溶解并稀释至刻度，摇匀，制成浓度为100 μg/mL的克百威标准储备液。4℃避光保存，有效期6个月。4.2.2克百威标准工作液（1 μg/mL）：精密移取克百威标准储备液（100 μg/mL）（4.2.1）0.1 mL，置于10 mL容量瓶中，用甲醇（4.1.1）稀释至刻度，摇匀，制成浓度为1 μg/mL的克百威标准工作液。临用新配。4.3材料克百威胶体金免疫层析试纸条，适用基质为蔬菜水果。需在阴凉、干燥、避光条件下保存。5仪器与设备5.1电子天平：感量为0.01 g。5.2移液器：10 μL~200 μL、100 μL~1000 μL。6分析步骤6.1试样制备选取新鲜样品，擦去表面泥土，剪成1 cm左右见方碎片，备用。6.2试样提取称取2 g试样（精确至0.05 g）放入离心管中，加入6 mL提取液（4.1.2），上下振荡1 min，静置1 min，上清液即为样品待测液。6.3测定步骤测试前，将未开封的试纸条恢复至室温。吸取100 μL样品待测液于试纸条的加样孔中，室温