DB15/T 2484-2021 胡萝卜小孢子培养技术规程

ICS65.020.20

CCSB05

15

内蒙古自治区地方标准

DB15/T2484—2021

胡萝卜小孢子培养技术规程

Technicalcodeofpracticeformicrosporecultureofcarrot

2021-12-25发布2022-01-25实施

内蒙古自治区市场监督管理局发布

DB15/T2484—2021

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起

草。

本文件由内蒙古自治区农牧厅提出。

本文件由内蒙古自治区果蔬标准化技术委员会（SAM/TC25）归口。

本文件起草单位：内蒙古自治区农牧业科学院。

本文件主要起草人：王葆生、陈源闽、刘晓蕊、廉勇、刘湘萍、张艳萍、朱春侠。

I

DB15/T2484—2021

胡萝卜小孢子培养技术规程

1范围

本文件规定了胡萝卜小孢子培养技术的操作流程。

本文件适用于胡萝卜的小孢子培养。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

NY/T2306花卉种苗组培快繁技术规程

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

小孢子microspore

高等植物生活史中雄配子体发育过程中短暂而重要的阶段，是减数分裂后四分体释放出的单倍性

单细胞。

小孢子培养microsporeculture

采用植物组织培养技术，把发育到一定阶段的小孢子，通过无菌操作技术接种在人工培养基上，诱

导形成愈伤组织或胚状体，进而形成完整植株的一种培养方式。

单倍体haploid

体细胞中含有本物种配子染色体数目的个体。

4试剂

超纯水

应符合GB/T6682中规定的三级超纯水。

1

DB15/T2484—2021

药品

消毒试剂：乙醇，氯化汞。

无机试剂：硝酸铵，硝酸钾，硫酸铵，氯化钙、硝酸钙，硫酸镁，磷酸二氢钾，磷酸二氢钠，碘

化钾，硼酸，硫酸锰，硫酸锌，钼酸钠，硫酸铜，氯化钴，硫酸亚铁，EDTA二钠盐。

有机试剂：肌醇，烟酸，盐酸吡哆醇、盐酸硫胺素、甘氨酸，叶酸，生物素，谷氨酰胺，丝氨

酸，谷胱甘肽。

生长调节剂：2,4-D，6-BA。

其他试剂：琼脂，活性炭，蔗糖。

所有药品等级均为分析纯。

5仪器设备

纯水仪，万分之一分析天平，pH计，移液枪，恒温培养箱，电磁炉，超净工作台，高压灭菌锅，离

心机，光学显微镜。

6培养基配制灭菌与分装

小孢子培养各阶段使用商品化的B5、NLN、MS和1/2MS基本培养基，具体成分及含量见附录A。按培

养基说明书用量加入基本培养基、根据附录A的用量加入除琼脂外的其它成分，待培养基内所有组分充

分溶解后，调pH值至5.8，定容，按附录A的用量加入琼脂粉，分别制成分离培养基、诱导培养基、分化

培养基和生根培养基。

将配制好的培养基分装至三角瓶中封口后进行高压蒸汽灭菌，灭菌应符合NY/T2306的规定。灭菌

结束后，待培养基温度降至55℃～60℃时，在超净工作台中将分离培养基、诱导培养基、分化培养基

分装至培养皿中、生根培养基分装至三角瓶中，自然冷却。

7小孢子培养技术流程

采样