GB/T 19650-2005 动物组织中437种农药多残留测定方法 气相色谱-质谱和液相色谱-串联质谱法

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C53伪日

中华人民共和国国家标准

GB/T19650-2005

动物组织中437种农药多残留测定方法

气相色谱一质谱和液相色谱一串联质谱法

Methodfordeterminationof437pesticidesresiduesinanimaltissues-

GC-MSandLC-MS-MSmethod

2005-02-04发布2005-08-01实施

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GB/T19650-2005

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本标准的附录A、附录B、附录c、附录D、附录E、附录F、附录G、附录H为资料性附录。

本标准由中华人民共和国秦皇岛出人境检验检疫局提出。

本标准由中华人民共和国河北出人境检验检疫局归口。

本标准起草单位：中华人民共和国秦皇岛出人境检验检疫局。

本标准主要起草人：庞国芳、曹彦忠、张进杰、范春林、刘永明、李学民、贾光群、石玉秋、吴艳萍、

郭彤彤。

本标准系首次发布的国家标准。

GB/T19650-2005

动物组织中437种农药多残留测定方法

气相色谱一质谱和液相色谱一串联质谱法

1范围

本标准规定了猪肉、牛肉、羊肉、兔肉、鸡肉中437种农药参（见附录A）残留量气相色谱一质谱和液

相色谱一串联质谱的测定方法。

本标准适用于猪肉、牛肉、羊肉、兔肉、鸡肉中437种农药残留量的测定。

本标准的方法检出限为0.0002mg/kg-0.3000mg/kg参（见附录A),

2规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有

的修改单不（包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究

是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。

GB/T6379测试方法的精密度通过实验室间试验确定标准测试方法的重复性和再现性

(GB/T6379-1986，neqISO5725：1981）

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法G（B/T6682-1992,neqISO3696:1987)

GB/T9695.19肉与肉制品取样方法G（B/T9695.19-1988,neqISO/DIS3100-1;1984)

3原理

试样用环己烷＋乙酸乙醋(1十1)均质提取，提取液浓缩定容后，用凝胶渗透色谱净化，根据不同检

测方式，用不同溶剂定容后，供气相色谱一质谱仪和液相色谱一串联质谱仪检测。

4试剂和材料

除另有说明外，水为GB/T6682规定的一级水。

4.1乙睛：色谱纯。

4.2环己烷：色谱纯。

4.3乙酸乙醋：色谱纯。

4.4环己烷＋乙酸乙醋混合溶剂：1十to

4.5正己烷：色谱纯。

4.6甲醇：色谱纯。

4.7无水硫酸钠：分析纯。用前在650℃灼烧4h,贮于干燥器中，冷却后备用。

4.8农药标准物质：纯度）95%.

4.9农药标准溶液

4.9.1标准储备溶液

准确称取5mg-10mg精（确至0.1mg）农药各标准物4（.8)分别放人10mL容量瓶中，根据标准

物的溶解度和测定的需要选甲苯、甲苯十丙酮混合液、二氛甲烷或甲醇等溶剂溶解并定容至刻度溶（剂

选择参见附录A).

4.9.2混合标准溶液混（合标准溶液A,B,C,D和E)

按照农药的性质和保留时间，将437种农药分成A,B,C,D,E五个组，并根据每种农药在仪器上的

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响应灵敏度，确定其在混合标准溶液中的浓度。本标准对437种农药的分组及其混合标准溶液的浓度

参见附录A.

依据每种农药的分组号、混合标准溶液浓度及其标准储备液的浓度，移取一定量的单个农药标准储

备溶液于100mL容量瓶中，A,B,C,D组农药用甲苯，E组农药用甲醇定容至刻度。混合标准溶液避

光4℃保存，可使用一个月。

4.9.3内标溶液

准确称取3.5mg环氧七氯于100mL容量瓶中，用甲苯定容至刻度。

4.9.4基质混合标准工作溶液

A,B,C,D组农药基质混合标准工作溶液是将40川曰内标溶液4（.9.3)和一定体积的A,B,C,D组

混合标准溶液(4（.9.2)分别加到1.0mL的样品空白基质提取液中，混匀，配成基质混合标准工作溶液

A,B,C和D,

E组农药基质混合标睽工作溶液是用不同体积E组混合标准溶液加到样品空白溶液中配成不同

浓度的基质混合标准工作溶液，用宁做标准工作曲线。

基质混合标准工作溶液应现用现配。

5仪器

5.1气相色谱一质谱仪：配有电子轰击源(ED,

5.2液相色谱一串联质谱仪：配有电喷雾离子源(ESD.

5.3凝胶渗透色谱仪：配有400mmX25mm，内装BI(-BeadsS-X3填料的净化柱。

5.4分析天平：感量0.1mg和。.01g各一台。

5.5旋转蒸发器。

5.6均质器：最大转速为24000r/mina

5.7离心机：最大转速为4200r/min.

5.8氮气吹干仪。

5.9鸡心瓶：200mL.

5.10移液器：1mL.

6试样制备与保存

6.1试样的制备

按GB/T9695.19抽取的样品用绞肉机绞碎，充分混匀，用四分法缩分至不少于500g，作为试样，

装人清洁器内，加封后，标明标记。

6.2试样的保存

将试样于一18℃冷冻保存。

7测定步骤

7.1提取

称取10g试样精（确至0.01g)，放人盛有20g无水硫酸钠(4（.7)的50mL离心管中，加人35ml,

环己烷＋乙酸乙醋混合溶剂4（.4)。用均质器5（.6)在15000r/min均质提取1.5min，把离心管放在

离心机5（.7)中，在3000r/min离心3min。上清液通过装有无水硫酸钠的筒形漏斗，收集于100mL

鸡心瓶中5（.9)，离心管中的动物组织残渣再用35mI_环己烷十乙酸乙醋混合溶剂提取一次，离心后上

清液转移到上述筒形漏斗中，合并提取液，将提取液于40℃水浴用旋转蒸发器5（.5)旋转蒸发至约

5mL，待净化。若以脂肪计，将提取液收集于已称量的鸡心瓶中，用旋转蒸发器在40℃水浴蒸发至

5mL，然后再用氮气吹干仪吹干残存的溶剂，鸡心瓶称量后，待净化。

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7.2凝胶渗透色谱净化

7.2.1条件

a）净化柱：400mmX25mm，内装BIO-BeadsS-X3填料；

b）检测波长：254nm;

c）流动相：乙酸乙醋＋环己烷(（1+1);

d）流速：5ml-／min;

e)进样量：5mL;

f）开始收集时间：22min;

b）结束收集时间：40min.

7.2.2净化

将浓缩的提取液或脂肪7（.1)用乙酸乙醋＋环己烷混合溶剂(（1+1)溶解转移至10m工J容量瓶中，

用5ml,环己烷＋乙酸乙醋混合溶剂分两次洗涤鸡心瓶，并转移至上述10mL容量瓶中，再用环己烷＋

乙酸乙醋混合溶剂定容至刻度，摇匀。将样液过滤人10ml.试管中，供凝胶渗透色谱仪净化，收集

22min-40min的馏分于100mL鸡心瓶中，并在40℃水浴旋转蒸发至0.5ml-,E组的农药，用氮气

吹干，再用1.0MI,乙睛＋水6（0+40)溶解残渣，供液相色谱一串联质谱进行检测；A,B,C,D组的农药，

加人2X5mL正己烷在40℃用旋转蒸发器进行溶剂交换两次，使最终样液体积约为1mL，加人40川、

内标溶液4（.9.3),混匀，供气相色谱一质谱的测定。

7.3测定

7.3.1气相色谱一质谱法

7.3.1.1条件

a)色谱柱：DB-1701(30mX0.25mmX0.25jm）石英毛细管柱或相当者；

b）色谱柱温度：40℃保持1min，然后以300C/min程序升温至1300C，再以50C/min升温至

2500C，再以l00C/min升温至300'C，保持5min;

c）载气：氦气，纯度）99.999，流速为1.2ml,/min;

d）进样口温度：2900C;

e)进样量：1tL;

f)进样方式：无分流进样，l.5min后打开分流阀和隔垫吹扫阀；

9）电子轰击源：70eV;

h）离子源温度：2300C；

i)GC-MS接口温度：280'C;

J）选择离子监测：每种化合物分别选择一个定量离子，2个～3个定性离子。每组所有需要检测

的离子按照出峰顺序，分时段分别检测。每种化合物的保留时间、定量离子、定性离子及定量

离子与定性离子的丰度比值参见附录B。每组检测离子的开始时间和住留时间参见附录Co

7.3.1.2定性测定

样品溶液按照气相色谱一质谱测定条件分别测定A,B,C,D四组，其中A组包含92种化合物，B组

包含99种化合物，C组包含75种化合物，D组包含102种化合物。进行样品测定时，如果检出的色谱

峰的保留时间与标准品的保留时间相一致，并且在扣除背景后样品质谱图中，所选择的离子均出现，而

且所选择的离子丰度比与标准品的离子丰度比相一致，则可判断样品中存在这种农药化合物。如果不

能确证，应重新进样，以扫描方式有（足够灵敏度）或采用增加其他确证离子的方式或用其他灵敏度更高

的分析仪器来确证。

7.3.1.3定f测定

本方法采用内标法单离子定量测定。内标物为环氧七氯。为减少基质的影响，定量应采用基质混

合标准工作溶液。标准溶液的浓度应与待测化合物的浓度相近。本方法的A,B,C,D四组标准物质在

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鸡肉基质中选择离子监测GC-MS图参见附录Do

7.3.2．液相色谱一串联质谱法

7.3.2.1条件

a）色谱柱：AtlantisT'dC,8,3f.m,150mmX2.1mm或相当者；

b）流动相及流速见表1;

c）柱温：400C；

d）进样量：20tL;

e)扫描方式：正离子扫描；

f)检测方式：多反应监测；

9）电喷雾电压：5500V;

h)雾化气压力：0.076MPa;

i）气帘气压力：0.083MPa;

J）辅助气流速：6L/min;

k）离子源温度：3500C;

D监测离子对、碰撞能量和去簇电压参见附录Eo

表1流动相及流速

tI4473500000/551.m011[000000000000n)1i(一与

7.3.2.2定性测定

样品溶液按照液相色谱一串联质谱测定条件分别进行测定，进行样品测定时，如果检出的色谱峰的

保留时间与基质标准中某种农药相一致，并且所选择的两对离子对的丰度比相一致，则可判定为样品中

存在这种农药残留。

7.3.2.3定f测定

本方法中液相色谱一串联质谱采用外标校准曲线法定量测定。为减少基质对定量测定的影响，需用

空白样液来配制所使用的一系列基质标准工作溶液，用基质标准工作溶液分别进样来绘制标准曲线，并

且保证所测样品中农药的响应值均在仪器的线性范围内。本方法的E组标准物质在鸡肉基质中总离

子流图参见附录Fo

7.4平行试验

按以上步骤对同一试样进行平行试验测定。

7.5空白试验

除不称取试样外，均按上述步骤进行。

8结果计算

8.1气相色谱一质谱测定结果可由计算机按内标法自动计算，也可按式（1)计算：

A‘A'、c‘m、1000

X＝-X=X二X-X.··········“············……（I）