GB/T 22951-2008 河豚鱼、鳗鱼中十八种磺胺类药物残留量的测定 液相色谱-串联质谱法

ICS67.050

X04OB

中华人民共和国国家标准

GB/T22951—2008

河豚鱼、鳗鱼中十八种

磺胺类药物残留量的测定

液相色谱-串联质谱法

Determinationof18sulfonamidesresiduesinfuguandeel—

LC-MS-MSmethod

2008-12-31发布2009-05-01实施

发布

GB/T22951—2008

前言

本标准的附录A、附录B为资料性附录。

本标准由国家质量监督检验检疫总局提出并归口。

本标准起草单位：中华人民共和国秦皇岛出入境检验检疫局。

本标准主要起草人：贾光群、曹彦忠、张进杰、石玉秋、姚智慧、庞国芳。

I

GB/T22951—2008

河豚鱼、鳗鱼中十八种

磺胺类药物残留量的测定

液相色谱■串联质谱法

1范围

本标准规定了河豚鱼、鳗鱼中十八种磺胺类药物（见表2）残留量液相色谱-串联质谱测定方法。

本标准适用于河豚鱼、鳗鱼中十八种磺胺类药物残留量的测定。

本标准的方法检出限均为5.0Mg/kgo

2规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有

的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究

是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。

GB/T6379.1测量方法与结果的准确度（正确度与精密度）第1部分：总则与定义

（GB/T6379.1—2004,ISO5725-1：1994,IDT）

GB/T6379.2测量方法与结果的准确度（正确度与精密度）第2部分：确定标准测量方法重复

性与再现性的基本方法（GB/T6379.2—2004,ISO5725-2：1994,IDT）

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法（GB/T6682—2008,ISO3696：1987,MOD）

3原理

河豚鱼、鳗鱼中磺胺类药物残留用乙月青提取，离心，上清液经无水硫酸钠脱水后，用氮气浓缩仪吹至

近干，残渣用乙11-0.01mol/乙酸钱溶液溶解，用正己烷脱脂，过0.2（«m滤膜后，样品溶液供液相色

谱-串联质谱仪测定，内标法定量。

4试剂和材料

4.1水：GB/T6682,—级。

4.2甲醇：色谱纯。

4.3乙睛：色谱纯。

4.4甲酸：色谱纯。

4.5正己烷：色谱纯。

4.6乙酸钱：优级纯。

4.7无水硫酸钠：经650°C灼烧4h,置于干燥器中备用。

4.80.01mol/乙酸钱溶液:称取0.77g乙酸钱（4.6）溶于1000m水中。

4.9定容液：乙W-0.01mol/乙酸钱溶液（3+22）。量取12m乙月青（4.3）和88m乙酸钱溶液

（4.8）混合均匀。

4.100.1%甲酸溶液：吸取1.0m甲酸（4.4）,用水稀释至1000m0

4.11十八种磺胺类药物标准物质：磺胺喀喘（CAS：68-35-9）、磺胺噬醴（CAS：72-14-0）、磺胺毗睫

（CAS:144-83-2）、磺胺甲基囉腱（CAS：127-79-7）.磺胺-6-甲氧喀睫（CAS：1220-83-3）、磺胺甲噬二卩坐

（CAS：144-82-1）、磺胺二甲喀睫（CAS：57-68-l）、磺胺甲氧哒嗪（CAS：80-35-3）,磺胺对甲氧唏曉（CAS：

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GB/T22951—2008

651-06-9）、磺胺氯哒嗪（CAS：80-32-0）、磺胺甲基异噁醴（CAS：723-46-6）、磺胺邻二甲氧嗨睫（CAS：

2447-57-6）、磺胺二甲异噁睦（CAS：127-69-5）、磺胺苯酰（CAS：127-71-9）,磺胺氯毗嗪

（CAS：102-65-8）、磺胺苯毗哩（CAS:526-08-9）、磺胺间二甲氧囉腱（CAS：1037-50-9）、磺胺座噁咻

（CAS：59-40-5）o纯度$99%。

4.120.1mg/m标准储备溶液:准确称取适量的每种磺胺类药物标准物质（4.11）,用甲醇（4.2）分别

配成0.1mg/m的标准储备溶液，该溶液在4"C保存。

4.135.0Mg/m磺胺类药物混合标准工作溶液:分别吸取各标准储备溶液（4.12）0.5m移至10m

容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，配成5.0（ug/m混合标准工作溶液。该溶液在4°C保存。

4.14磺胺内标物质:磺胺甲基异噁哩-D4、磺胺囉曉-D4、磺胺噬哩-D4。纯度$99%。

4.155.0Mg/m磺胺甲基异噁哩-D4、磺胺喀睫-D4、磺胺®Ui-D4内标标准储备溶液：称取适量磺胺

甲基异噁卩坐-D4,磺胺唏喘-D4,磺胺廛卩坐-D4标准物质（4.14）,用甲醇分别配成0.1mg/m。该溶液

在4C保存。

4.16磺胺类药物混合内标工作溶液：分别吸取磺胺甲基异噁睦-D4,磺胺咳喘-D4,磺胺廛卩坐-D4储备

溶液（4.15）0.5m移至10m容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，配成浓度为5Mg/m混合内标工作溶

液。该溶液在4°C保存。

4.17基质标准工作溶液：吸取不同体积混合标准工作溶液（4.12）和4卩混合内标工作溶液（4.16）,

用空白样品提取液配成5.0ng/m、10.0ng/m、20.0ng/m、50.0ng/m、100.0ng/m不同浓度的

基质标准工作溶液。当天配制。

4.18滤膜：0.2Mmo

5仪器

5.1液相色谱-串联质谱仪：配有电喷雾离子源。

5.2分析天平：感量0.1mg,0.01g„

5.3离心管：50mo

5.4均质器。

5.5液体混匀器。

5.6离心机。

5.7氮气浓缩仪。

5.8浓缩管：10mo

6试样的制备与保存

6.1试样的制备

从全部样品中取出有代表性样品约1leg,充分搅碎，混匀，均分成两份，分别装入洁净容器内。密

封，作为试样，标明标记。在抽样和制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。

6.2试样保存

将试样于一18C冷冻保存。

7测定步骤

7.1样品制备

称取10g试样，精确至0.01go置于50m离心管（5.3）中，加入20卩内标工作溶液（4.16）,然

后加入20g无水硫酸钠（4.7）和25m乙月青（4.3）,均质2min,以3000r/min离心3min。上清液转

移至50m容量瓶中，残渣再加入20m乙睛，重复上述操作一次。合并提取液，用乙月青定容至刻度

后，混匀。吸取10m至浓缩管（5.8）中，在45€水浴中氮气吹至近干。准确加入1m定容液（4.9）

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GB/T22951—2008

和1m正己烷（4.5）溶解残渣，涡旋1min,以3000r/min离心3min,吸取上层正己烷弃去，再加入

1m正己烷，重复上述步骤，直至下层水相变成透明液体。取下层清液，过0.2卩m滤膜（4.18）后，用

液相色谱-串联质谱仪测定。

按上述操作步骤制备样品空白提取液。

7.2测定条件

7.2.1液相色谱参考条件

a）色谱柱:Atlantis,3/am,150mmX2.1mm（内径）或相当者；

b）流动：A：乙月青,B：0.1%甲酸溶液,C：甲醇。梯度洗脱条件见表1;

c）流速：0.2mL/min；

d）柱温：35°C；

e）进样量：20/a0

表1流动相梯度条件

时间/minA/%B/%C/%

0.0010.080.010.0

3.0020.070.010.0

&0035.055.010.0

12.0070.020.010.0

12.0110.080.010.0

17.0010.080.010.0

7.2.2质谱参考条件

a）离子源：电喷雾离子源；

b）打描方式：正离了扫描；

C）检测方式：多反应监测；

d）电喷雾电压：5500V；

e）雾化气压力：0.076MPa；

f）气帘气压力：0.069MPa；

g）辅助气流速：6L/min；

h）离子源温度：350°C；

i）定性离子对、定量离子对、碰撞气能量和去簇电压见表2。

表2十八种磺胺类药物的定性离子对、定量离子对、碰撞气能量和去簇电压

定性离子对定量离子对

化合物中文名称化合物英文名称碰撞气能量/V去簇电压/V

S/z）Cm/z）

251/1562355

磺胺喘呢sulfadiazine251/156

251/1852750

256/1562255

磺胺噪些sulfathiazole256/156

256/1073247

250/1562550

磺胺毗呢sulfapyridine250/156

250/1842560

265/1562550

磺胺甲基唏呢sulfamethoxypyridazine265/156

265/1722460

281/1562565

磺胺-6-甲氧唏唏sulfamonomethoxine281/156

281/2152550

3

GB/T22951—2008

表2(续)

定性离子对定量离子对

化合物中文名称化合物英文名称碰撞气能量/V去簇电压/V

S/z)(m/z)

271/1562050

磺胺甲嗟二睦sulfamethizole271/156