GB/T 16286-1996 食品中蔗糖的测定方法 酶-比色法

GB/T16286-1996

前言

食品中蔗糖的测定方法，一般采用盐酸水解法。由于盐酸水解蔗糖过程中，还有其他糖类被水解为

还原糖，导致测定结果偏高。本标准采用的酶一比色法是在检索了近20年148篇国外文献的基础上，经

过反复实验、验证而制定的。由于酶法具有高度的专一性(R-果糖昔酶只能催化蔗糖转化为葡萄糖和果

糖)，灵敏度高，操作简便，因此测定结果准确。

蔗糖酶解后的产物—葡萄塘的测定方法，与GB/T16285-1996保持一致。

本标准的附录A是标准的附录。

本标准由全国食品工业标准化技术委员会提出并归口。

本标准起草单位:中国农垦北方食品监测中心。

本标准经全国食品工业标准化技术委员会秘书处审核。

本标准主要起草人:张宗城、刘宁、郝I

中华人民共和国国家标准

食品中蔗糖的测定方法

Gs/T16286一1996

酶一比色法

Methodfordetermin.tionofsucroseinfood-

Enzyme-colorimetrkmethod

1范围

本标准规定了用酶一比色法测定食品中蔗糖的方法。

本标准适用于各类食品中蔗糖的测定。

本标准最低检出限量为。04Kg(蔗糖/mL(试液)。

2原理

在件果糖昔酶(各FS)催化下，蔗糖被酶解为葡萄糖和果糖。葡萄糖氧化酶(GOD)在有氧条件下，催

化各D-葡萄糖(葡萄糖水溶液状态)氧化，生成D-葡萄糖酸-s-内酷和过氧化氢。受过氧化物酶(POD)催

化，过氧化氢与4-氨基安替比林和苯酚生成红色酿亚胺。在波长505nm处测定酿亚胺的吸光度，计算

食品中蔗糖的含量。

C,2H22011+H20士月三C,H,206(G)+C6H,A(F)

Cco,HH,A:0。((GG))++O0Z。-t塑址,H,o06+-11202

H202+C,H,OH+CHN,O坚聚c6H,NO+H20

3试剂

31组合试剂盒

1号瓶:内含详果糖普酶(rfuctosidase)400U(活力单位)、柠檬酸、柠檬酸三钠;

2号瓶:内含。2mol/L磷酸盐缓冲液(pH=7.6)200mL，其中含4-A基安替比林0.00154mol/L;

3号瓶:内含。.022mol/L苯酚溶液200ml.;

4号瓶:内含葡萄糖氧化酶(glucoseoxidase)S00U(活力单位)、过氧化物酶(辣根，peroxidase)

2000U活力单位)。

1,2,3,4号瓶须在4℃左右保存。

3.2酶试剂溶液

3.2.1将1号瓶中的物质用重蒸馏水溶解，使其体积为66mL，轻轻摇动(勿剧烈摇动)，使酶完全溶

解。此溶液即为卜果糖普酶试剂，其中柠檬酸(缓冲溶液)浓度为0.1mol,/L,PH=4.6。在4℃左右保存，

有效期一个月。

川将2号瓶与3号瓶中的溶液充分混合。

233.

将4号瓶中的酶溶解在3.2.2混合液中，轻轻播动(勿剧烈摇动)