GB/T 22954-2008 河豚鱼和鳗鱼中链霉素、双氢链霉素和卡那霉素残留量的测定 液相色谱-串联质谱法

ICS67.050

X04

中华人民共和国国家标准

GB/T22954—2008

河豚鱼和鳗鱼中链霉素、双氢链霉素

和卡那霉素残留量的测定

液相色谱-串联质谱法

Determinationofstreptomycin,dihydrostreptomycinand

kanamycinresiduesinfuguandeel—

LC-MS-MSmethod

2008-12-31发布2009-05-01实施

发布

GB/T22954—2008

前言

本标准的附录A、附录B为资料性附录。

本标准由国家质量监督检验检疫总局提出并归口。

本标准起草单位：中华人民共和国秦皇岛出入境检验检疫局。

本标准主要起草人:刘晓茂、张守军、张进杰、曹彦忠、杨志伟、曹亚平、庞国芳。

I

GB/T22954—2008

河豚鱼和鳗鱼中链霉素、双氢链霉素

和卡那霉素残留量的测定

液相色谱■串联质谱法

1范围

本标准规定了河豚鱼和鳗鱼中链霉素、双氢链霉素和卡那霉素残留量液相色谱-串联质谱测定

方法。

本标准适用于河豚鱼和鳗鱼中链霉素、双氢链霉素和卡那霉素残留量的测定。

本标准方法的检出限:链霉素、双氢链霉素和卡那霉素的检出限均为10.0Mg/kg。

2规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有

的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究

是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。

GB/T6379.1测量方法与结果的准确度(正确度与精密度)第1部分：总则与定义

(GB/T6379.1—2004,ISO5725-1：1994,IDT)

GB/T6379.2测量方法与结果的准确度(正确度与精密度)第2部分：确定标准测量方法重复

性与再现性的基本方法(GB/T6379.2—2004,ISO5725-2：1994,IDT)

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法(GB/T6682—2008,ISO3696：1987,MOD)

3原理

河豚鱼或鳗鱼试样中的抗生素用磷酸溶液提取，三氯乙酸沉淀蛋白，用苯磺酸型和竣酸型固相萃取

柱净化。液相色谱-串联质谱仪(ESI+)检测,外标法定量。

4试剂和材料

除另有说明外，所用试剂均为优级纯。

4.1水：GB/T6682,—级。

4.2甲醇：色谱纯。

4.3乙睛：色谱纯。

4.4甲酸。

4.5浓磷酸。

4.6磷酸氢二钾(K2HP()4)O

4.7三氯乙酸(C2HC13()2)o

4.8庚烷磺酸钠(C7“Na()：,S・巴())。

4.95%磷酸溶液(1+19)：取50niL浓磷酸(4.5),用水定容至1L。

4.100.2mol/L磷酸盐缓冲溶液：p=&5。称取34.8g磷酸氢二钾(4.6)用水溶解，定容至1L,用

氢氧化钠溶液调节p=&5。

4.11三氯乙酸溶液：50%,质量分数。取2Cg三氯乙酸(4.7),用水定容至20mL0

4.120.01mol/L庚烷磺酸钠溶液:称取2.20g庚烷磺酸钠(4.8),用水溶解，定容至1L。

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GB/T22954—2008

4.13SPE洗脱溶液：取4mL甲酸(4.4),用0.01mol/L庚烷磺酸钠溶液(4.12)定容至100mLo

4.1425%甲醇溶液(1+3)：取25mL甲醇(4.2),用水定容至100mL0

4.15标准物质：链霉素(CAS：3810-74-0).双氢链霉素(CAS：128-46-1)和卡那霉素(CAS：25389-94-0)；

纯度均$98%。

4.161.0mg/mL标准储备溶液:称取适量的链霉素、双氢链霉素和卡那霉素标准物质(4.15),分别用

0.3%乙酸水溶液溶解并配制成1.0mg/mL的标准储备溶液。避光保存于一18C冰柜中。

4.170.1Mg/mL混合标准溶液：吸取适量链霉素、双氢链霉素和卡那霉素标准储备溶液(4.16),用

0.3%乙酸水稀释成0.1Mg/mL的混合标准溶液，避光保存于一18C冰柜中。

4.18苯磺酸型固相萃取柱(500mg,3mL)或相当者。使用前依次用5mL甲醇和10mL水预处理，

保持柱体湿润。

4.19竣酸型固相萃取柱(500mg,3mL)或相当者。使用前依次用5mL甲醇和10mL水预处理，保

持柱体湿润。

4.20滤膜：0.2Mmo

5仪器

5.1液相色谱-串联四极杆质谱仪，配有电喷雾离子源。

5.2分析天平：感量0.1mg和0.01go

5.3液体混匀器。

5.4固相萃取装置。

5.5均质器。

5.6真空泵：真空度应达到80kPao

5.7微量注射器：25mL,100mLo

5.8p计：测量精度±0.02p单位"

5.9具塞离心管：100mLo

5.10刻度离心管：5mLo

5.11贮液器：50mLo

5.12离心机:转速4000r/min以上。

6试样的制备与保存

6.1试样的制备

实验室样品混合均匀，分出0.5kg作为试样。

6.2试样保存

试样置于一18€冰柜，避光保存。

7测定步骤

7.1待测样品溶液的制备

7.1.1样品提取和初净化

称取河豚鱼或鳗鱼样品iog(精确到0.01g),置于100mL离心管中，加入30mL5%磷酸溶液

(4.9)，均质3min,并用5%磷酸溶液清洗均质器刀头合并洗涤液，加入3mL三氯乙酸溶液(4.H)涡旋

混合后在4000r/min下离心10min0上清液全部倒入下接苯磺酸型固相萃取柱(4.18)的贮液器中，

在固相萃取装置上使样液以小于2mL/min的流速通过萃取柱，待样液全部通过固相萃取柱后，依次用

5mL5%磷酸溶液(4.9)和10mL水洗涤苯磺酸型固相萃取柱(4.18),弃去全部流出液。用20mL磷

酸盐缓冲溶液(4.10)洗脱至50mL离心管中。

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