GB/T 18932.25-2005 蜂蜜中青霉素G、青霉素V、乙氧萘青霉素、苯唑青霉素、邻氯青霉素、双氯青霉素残留量的测定方法 液相色谱-串联质谱法

ICS67.180.10

X31

中华人民共和国国家标准

GB/T18932.25-2005

蜂蜜中青霉素G、青霉素V、

乙氧蔡青霉素、苯哇青霉素、邻氯青霉素、

双氯青霉素残留量的测定方法

液相色谱一串联质谱法

MethodforthedeterminationofpenicillinG,penicillinV,

nafcillin,oxacillin,cloxacillin,dicloxacillinresiduesinhoney-

LC-MS-MSmethod

2005-02-04发布2005-08-01实施

中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布

中国国家标准化管理委员会

GB/T18932.25-2005

前言

GB/T18932本部分的附录A、附录B为资料性附录。

本部分由中华人民共和国秦皇岛出人境检验检疫局提出。

本部分由中华全国供销合作总社归口

本部分起草单位:中华人民共和国秦皇岛出人境检验检疫局。

本部分主要起草人:庞国芳、李学民、张进杰、曹彦忠、范春林、刘永明、赵为、郭彤彤、石玉秋。

本部分系首次发布的国家标准。

GB/T18932.25-2005

蜂蜜中青霉素G、青霉素V、

乙氧蔡青霉素、苯哇青霉素、邻氯青霉素、

双氯青霉素残留量的测定方法

液相色谱一串联质谱法

范围

GB/T18932的本部分规定了蜂蜜中青霉素G、青霉素V、乙氧蔡青霉素、苯哇青霉素、邻氯青霉

素、双氯青霉素残留量的液相色谱一串联质谱测定方法。

本部分适用于蜂蜜中青霉素G、青霉素V、乙氧蔡青霉素、苯哩青霉素、邻氯青霉素、双氯青霉素残

留量的测定。

本部分的方法检出限:青霉素G、青霉素V、苯噢青霉素为1.0pg/kg;邻氯青霉素、双抓青霉素为

2.0pg/kg;乙氧禁青霉素为0.5pg/kg,

2规范性引用文件

下列文件中的条款通过GB/T18932的本部分的引用而成为本部分的条款。凡是注日期的引用文

件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本部分达成

协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本

部分。

GB/T6379测试方法的精密度通过实验室间试验确定标准测试方法的重现性和再现性(GB/T

6379-1986,neqISO5725:1981)

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法(GB/T6682-1992,neqISO3696:1987)

3原理

试样中青霉素残留，用去离子水溶解后，溶液用OasisHLB或相当的固相萃取柱净化，液相色谱-

串联质谱仪测定，外标法定量。

4试荆和材料

除另有说明外，所用试剂均为优级纯，水为GB/T6682规定的一级水。

4.1甲醇:色谱纯。

4.2乙睛:色谱纯。

4.3乙酸:优级纯。

4.4乙睛+水((1+3):量取25mL乙腊(4.2)与75mL水混合。

4.5OasisHLB固相萃取柱或相当者:500mg,6ml,。使用前分别用5mL甲醇(4.1)和10mL水预

处理，保持柱体湿润。

4.6青霉素G、青霉素V、乙氧禁青霉素、苯哇青霉素、邻氯青霉素、双氯青霉素标准物质:纯度)99%.

4.7青霉素G、青霉素V、乙氧蔡青霉素、苯哇青霉素、邻氯青霉素、双氯青霉素标准储备溶液:准确称

取适量的每种标准物质((4.6)，分别用乙睛(4.4)配制成浓度为1.0mg/mL的标准储备溶液。储备液贮

存在一18℃冰柜中。

4.8青霉素G.青霉素V、乙氧蔡青霉素、苯哇青霉素、邻氯青霉素、双氯青霉素标准工作溶液:根据需

GB/T18932.25-2005

要吸取适量青霉素G、青霉素V、乙氧蔡青霉素、苯哇青霉素、邻氯青霉素、双氯青霉素标准储备溶液

(4.7)，用空白样品提取液稀释成适当浓度的基质混合标准工作溶液。

5仪器

5.1液相色谱一串联四极杆质谱仪:配有电喷雾离子源(ESI).

5.2分析天平:感量0.1mg和。.01g各一台。

5.3液体混匀器。

5.4固相萃取真空装置。

5.5贮液器:50mL.

5.6微量注射器,25pL,100pL.

5.7刻度样品管:5mL，精度为0.1mL,

5.8真空泵:真空度应达到80kPa,

5.9pH计:测量精度士。.02.

5.10氮气吹干仪。

试样的制备与保存

6.1试样的制备

对无结晶的实验室样品，将其搅拌均匀。对有结晶的样品，在密闭情况下，置于不超过60℃的水浴

中温热，振荡，待样品全部融化后搅匀，迅速冷却至室温。分出。.5kg作为试样。制备好的试样置于样

品瓶中，密封，并做上标记。

5.2试样保存

将试样于常温下保存。

测定步骤

7.1试样溶液的制备

称取5g试样(精确到。01g)置于150mL三角瓶中，加人25mI去离子水，于液体混匀器上快速

混合1min，使试样完全溶解。样液移至下接OasisHLB柱((4.5)的贮液器中，以小于或等于3mL/min

的流速通过Oasi。固相萃取柱后，用5m1水洗柱，弃去全部流出液。在“kPa的负压下，减压抽干

20min，最后用3m1_甲醇(4.1)洗脱，收集洗脱液于刻度样品管(5.7)中，于40℃水浴中用氮气吹干仪

吹干，用乙睛(4.4)定容至1mL，摇匀后，供液相色谱一串联质谱仪测定。

7.2测定

7.2.1液相色谱条件

a)色谱柱:SunFire'"Qs3.5pm,150mmX2.1mm(内径)或相当者;

b>流动相及流速见表1;

c)柱温:300C;

d)进样量,20KI。

表1液相色谱梯度洗脱条件

时间/min流速/(pL/min)水(含。.4%乙酸/)(%)乙睛八%)

0.0020060.040.0

15.0020035.065.0

15.0120060.040.0

25.01