YY/T 1849-2022 重组胶原蛋白

ICS1104030

CCSC.30.

中华人民共和国医药行业标准

YY/T1849—2022

重组胶原蛋白

Recombinantcollagenprotein

2022-01-13发布2022-08-01实施

国家药品监督管理局发布

YY/T1849—2022

目次

前言

…………………………Ⅰ

范围

1………………………1

规范性引用文件

2…………………………1

术语和定义

3………………1

质量控制

4…………………2

通则

4.1…………………2

制备工艺的质量控制

4.2………………2

重组胶原蛋白的质量控制

4.3…………2

检测项目要求和检测方法

5、………………2

通则

5.1…………………2

理化项目

5.2……………3

鉴别

5.3…………………4

纯度

5.4…………………4

杂质污染物和添加剂

5.5、………………5

含量

5.6…………………6

结构表征

5.7……………6

生物学功能

5.8…………………………7

安全性试验

5.9…………………………8

稳定性

6……………………9

生物学评价

7………………9

包装运输和贮存

8、…………………………9

附录资料性重组胶原蛋白特性分析

A()………………10

附录规范性细胞黏附性测定离心法

B()———…………12

附录规范性细胞移行试验细胞划痕法

C()———………14

参考文献

……………………15

YY/T1849—2022

前言

本文件按照标准化工作导则第部分标准化文件的结构和起草规则的规定

GB/T1.1—2020《1:》

起草

。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利本文件的发布机构不承担识别专利的责任

。。

本文件由国家药品监督管理局提出

。

本文件由中国食品药品检定研究院归口

。

本文件起草单位中国食品药品检定研究院四川省药品检验研究院四川省医疗器械检测中心

:、()、

山东省医疗器械和药品包装检验研究院北京大学口腔医学院口腔医疗器械检验中心陕西巨子生物技

、、

术有限公司山西锦波生物医药股份有限公司江苏创健医疗科技有限公司江苏江山聚源生物技术有

、、、

限公司

。

本文件主要起草人陈亮刘兴兰侯丽韩建民徐丽明段志广李海航王建赵健烽赵代国

:、、、、、、、、、、

王鸾鸾王觉晓范行良吴洋蒋若丹兰婉玲盖潇潇严建亚孙丹丹田旭栋黄建民

、、、、、、、、、、。

Ⅰ

YY/T1849—2022

重组胶原蛋白

1范围

本文件规定了重组胶原蛋白的质量控制要求检测指标及其检测方法等

、。

本文件适用于作为医疗器械原材料的重组胶原蛋白的质量控制

。

注鉴于目前的技术研发现状本文件中的重组胶原蛋白主要指基于人的胶原蛋白基因重组的产物基于非人胶

:,。

原蛋白基因的重组胶原蛋白或类胶原蛋白产物可参考本文件但需要根据具体的产品特性和生产工艺进行质

,

量控制

。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款其中注日期的引用文

。,

件仅该日期对应的版本适用于本文件不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于

,;,()

本文件

。

医疗器械生物学评价第部分风险管理过程中的评价与试验

GB/T16886.11:

医疗器械生物学评价第部分医疗器械免疫毒理学试验原则和方法

GB/T16886.2020:

医疗保健产品灭菌湿热第部分医疗器械灭菌过程的开发确认和常规控制

GB18278.11:、

要求

医疗保健产品灭菌环氧乙烷第部分医疗器械灭菌过程的开发确认和常规控

GB18279.11:、

制的要求

医疗保健产品灭菌辐射第部分医疗器械灭菌过程的开发确认和常规控制

GB18280.11:、

要求

组织工程医疗器械产品型胶原蛋白表征方法

YY/T1453Ⅰ

所有部分医疗器械免疫原性评价方法

YY/T1465()

组织工程医疗器械产品胶原蛋白第部分型胶原蛋白分子量检测十二

YY/T1805.22:Ⅰ

烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳法

组织工程医疗器械产品胶原蛋白第部分基于特征多肽测定的胶原蛋白含

YY/T1805.33:

量检测液相色谱质谱法

-

中华人民共和国药典

术语和定义

3

下列术语和定义适用于本文件

。

31

.

胶原蛋白collagen

胶原

一类含有至少种在遗传学上不同类型的分泌蛋白质家族主要担任机体的结构支撑功能具有

20,,

独特的由三条多肽链被称为链组成的三螺旋构型并具有一定的生物学功能

(α),。

1

YY/T1849—2022

32

.

重组胶原蛋白recombinantcollagenprotein

采用重组技术对编码所需人胶原蛋白质的基因进行遗传操作和或修饰利用质粒或病毒

DNA,(),

载体将目的基因带入适当的宿主细胞细菌酵母或其他真核细胞等中表达并翻译成胶原蛋白

(、),(3.1)

或类似胶原蛋白的多肽经过提取和纯化等步骤制备而成

(3.1),。

4质量控制

41通则

.

由于重组基因片段的型别与序列的不同表达体系的差异致使获得的产物不尽相同与天然胶原

,,,

蛋白相比氨基酸组成分子量大小和或结构可能差异很大甚至是个全新的蛋白质因此宜对其进

,、(),。,

行全面的特性分析见附录进行严格的质量控制

(A),。

重组胶原蛋白的质量控制与分子量大小结构特性质量属性复杂程度以及生产工艺相关质量控

、、。

制体系主要包括原辅料质量控制生产工艺和过程控制及最终成品的检测等应通过成品检测过程控

、。、

制和工艺验证相结合的方法确保各类杂质已去除或降低至可接受水平

,。

42制备工艺的质量控制

.

重组胶原蛋白属于一种重组蛋白应参照中华人民共和国药典人用重组蛋白制品总论

,《》“DNA”

中制造的所有要求包括基本要求工程细胞细菌酵母或其他真核细胞等的控制表达载体和宿

“”,:、(、)(

主细胞细胞库系统细胞库的质量控制细胞基质的遗传稳定性生产过程的控制细胞培养提取和

、、、)、(、

纯化原液半成品和成品和生产工艺变更要求建立质量控制体系不适用条款或事项需给出合理的

、、),。

说明

。

43重组胶原蛋白的质量控制

.

重组胶原蛋白成品的质量控制包括采用参比品和经验证的方法评估已知和或潜在的成品相关物

()

质和工艺相关物质以及采用适宜的方法对成品鉴别生物学功能纯度和杂质等进行检测和分析

,、、。

选择已证明足够稳定且适合临床试验的一个多个批次或用一个代表批次作为参比品用于鉴

(),,

别理化和生物学功能等各种分析根据重组蛋白制品特性应对参比品做全面深入的表征特

、。DNA,/

性分析参比品的建立和制备应参照中华人民共和国药典生物制品国家标准物质制备和标定的相

。《》“”

关要求

。

用于理化测定等方面的参比品如用于肽图或等电点测定的参比品可用原液直接分装制备一般

,,,

以下或经验证的贮存条件下保存根据重组蛋白制品特性参比品应进行必要的分析鉴

-70℃。DNA,

定包括蛋白质含量等电点纯度端氨基酸序列分子量肽图指纹肽图谱库二硫键分析及糖基

,:、、、N、、、、

分析酵母或其他真核细胞表达等

()。

5检测项目要求和检测方法

、

51通则

.

收获液经提取纯化分装于中间贮存容器中即为原液原液的检验项目取决于工艺的验证一致性

、。、

的确认和预期成品相关杂质与工艺相关杂质的水平应采取适当方法对原液质量进行检测必要时应

。,

与参比品进行比较经工艺验证后可由一批或多批原液合并生产半成品制成成品前如需对原液进

。,,,

行稀释或加入其他辅料制成半成品应确定半成品的质量控制要求包括检测项目和可接受标准

,,。

2

YY/T1849—2022

根据具体重组胶原蛋白成品的特性确定需要进行的特性分析检测项目建立或验证重组胶原蛋白

。

生产过程的有效性或可接受性的特性分析检测项目可不纳入常规质量控制中但应对某一特定质量属

,

性是否放入常规放行标准予以说明常规质量控制的检测项目包括如下几个方面

。。

52理化项目

.

521外观如性状颜色

..(、)

肉眼直接观测供试品应为白色淡黄色无色透明液体或凝胶或白色类白色冻干粉或海绵状

,//,/

固体

。

522可见异物

..

适用时按照中华人民共和国药典可见异物检查法的灯检法进行检测供试品应无明显

,《》“”“”,

异物

。

523溶解性

..

应根据供试品的溶解特性对供试品在水稀酸或中性盐溶液中的溶解程度进行表征和阐述

,、。

524水分

..

取供试品约按照中华人民共和国药典水分测定法第二法烘干法测定或取供试品

1g~2g,《》“”(),

约按照中华人民共和国药典热分析法热重法测定升温程序从室温以速

10mg《》“”(TG),:10℃/min

率升温至保持减失重量应符合所标示范围规定仲裁方法为水分测定法

105℃,60min。。。

525炽灼残渣

..

按照中华人民共和国药典炽灼残渣检查法测定供试品应符合所标示范围

《》“”,。

526pH值

..

用氯化钠溶液将供试品制成的溶液若使用其他溶剂溶解应明确说明使用溶剂及

0.9%1mg/mL,

浓度按照中华人民共和国药典值测定法测定应符合所标示范围

,《》“pH”,。

527渗透压摩尔浓度

..

如适用用氯化钠溶液将供试品制成的溶液或根据临床预期使用将供试品配制

,0.9%1mg/mL,

成相应溶液按照中华人民共和国药典渗透压摩尔浓度测定法测定应符合所标示范围

,《》“”,。

528动力黏度

..

取供试品按照中华人民共和国药典黏度测定法的旋转黏度计测定法测定需要详细描述试

《》“”“”,

验条件动力黏度值应符合所标示范围

,。

注对于重组胶原蛋白凝胶宜测定动力黏度

:,。

529热稳定性

..

5291采用差示扫描量热法进行解聚温度分析按照中华人民共和国药典热分析法进

...(DSC)。《》“”

行初始温度以速度升温至记录热分析曲线根据供试品的通常贮存性状

。20℃,2℃/min200℃,。

如冻干粉等和预期使用性状进行相同或相似样品条件下的差示扫描量热分析

()。

注水不溶性重组胶原蛋白的热稳定性测定宜采用差示扫描量热法进行

:(DSC)。

5292将供试品原液或重组胶原蛋白冻干粉或海绵加水制成的溶液置水

...,10mg/mL,(57±0.5)℃

3

YY/T1849—2022

浴中保温后用可见异物检查装置肉眼观察应无凝胶化或絮状物

4h,,。

5210装量及其差异

..

按照中华人民共和国药典最低装量检查法根据供试品性状溶液凝胶冻干海绵或冻干粉末

《》“”,(、、

等和装量的不同确定装量的允差要求

)。

53鉴别

.

531肽图

..

5311按照中华人民共和国药典肽图检查法的第一法胰蛋白酶裂解反相高效液相色谱法进

...《》“”“-”

行测定应与参比品肽图一致主要特征肽段相对比例响应强度应与参比品基本一致

,,()。

注如胰蛋白酶不能水解选择适宜的其他蛋白酶

:,。

5312按照中华人民共和国药典质谱法进行测定采用适宜的质谱技术对各色谱峰对应的肽段

...《》“”,

进行定性序列覆盖率应符合所标示范围

,。

注如胰蛋白酶不能水解选择适宜的其他蛋白酶

:,