YY/T 0616-2007 一次性使用医用手套 生物学评价要求与试验

犐犆犛１１．１４０．０１

犆３０

中华人民共和国医药行业标准

／—

犢犢犜０６１６２００７

一次性使用医用手套

生物学评价要求与试验

ㅤㅤㅤㅤ

—

犕犲犱犻犮犪犾犾狅狏犲狊犳狅狉狊犻狀犾犲狌狊犲

犵犵

犚犲狌犻狉犲犿犲狀狋狊犪狀犱狋犲狊狋犻狀犳狅狉犫犻狅犾狅犻犮犪犾犲狏犪犾狌犪狋犻狅狀

狇犵犵

（：，）

ＥＮ４５５３２０００ＭＯＤ

２００７０７０２发布２００８０３０１实施

国家食品药品监督管理局发布

／—

犢犢犜０６１６２００７

目次

前言Ⅰ

引言Ⅱ

１范围１

２规范性引用文件１

３术语和定义１

４要求２

５试验方法２

６试验报告３

附录（规范性附录）用改良分析法测定天然橡胶手套水溶性蛋白质的方法

ＡＬｏｗｒ４

ｙ

附录（资料性附录）医用手套可溶出蛋白质和过敏原的免疫学测定方法

Ｂ１０

附录（资料性附录）高效液相色谱法（）测定氨基酸（）

ＣＨＰＬＣＡＡＡ１２

附录（资料性附录）术语

Ｄ１６

参考文献１７

ㅤㅤㅤㅤ

／—

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引言

最近几年，常有报道胶乳产品由于含有胶乳蛋白质使医护人员和病人产生不良反应，由于化学物

质、润滑剂、灭菌残留物（环氧乙烷）、致热物等残留物产生的不良反应也在科学文献中有所描述。其中

报道最多的是天然橡胶胶乳手套产生不良反应，但其他聚合物制成的手套也可以引起一些不良反应。

／标准给出了有关医疗器械生物学评价指南，并包括了特定试验和其他涉及安全性规

ＧＢＴ１６８８６

范的试验方案。

本标准未涉及使用医用手套所产生的全部不良反应（如速发型超敏反应），存在于手套中的特异性

过敏原会引发这些不良反应，导致这些反应的因素有：

ａ）长期、高频次佩带手套；

ｂ）皮肤与黏膜直接与过敏原（又称变应原）接触，特别在皮肤与黏膜有损伤的情况下接触过敏原

或吸入微粒；

）常年使用手套，手套紧密贴敷皮肤。

ｃ

本标准给出了用以评价医用手套生物学安全性的试验方法，作为／风险管理过程的一

ＹＹＴ０３１６

部分。

本标准没有规定胶乳蛋白质和化学物质的可接受水平，因为在这一领域有关安全性评价因素（如过

敏原的识别、致敏作用阈和过程控制等）尚不十分清楚。随着对其认知的不断提高，预期本标准将会被

修订。目前进一步测定和控制这些过敏原的试验方法还处于研究之中。

ㅤㅤㅤㅤ

Ⅱ

／—

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一次性使用医用手套

生物学评价要求与试验

１范围

本标准规定了一次性使用医用手套生物学安全性评价的要求，给出了标示和手套包装的要求以及

所用试验方法的信息。本标准还包括用于可溶出蛋白质和过敏原测定的免疫学试验方法综述。

２规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有

的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究

是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。

／医疗器械生物学评价第部分：评价与试验（／—，

ＧＢＴ１６８８６．１１ＧＢＴ１６８８６．１２００１

：，）

ＩＳＯ１０９９３１１９９７ＩＤＴ

／医疗器械生物学评价第部分：体外细胞毒性试验（／—，

ＧＢＴ１６８８６．５５ＧＢＴ１６８８６．５２００３

：，）

ＩＳＯ１０９９３５１９９９ＩＤＴ

／医疗器械生物学评价第部分：环氧乙烷灭菌残留量（／—，

ＧＢＴ１６８８６．７７ＧＢＴ１６８８６．７２００１

：，）

ＩＳＯ１０９９３７１９９５ＩＤＴ

／医疗器械生物学评价第部分：刺激与迟发型超敏反应试验（／—，

ＧＢＴ１６８８６．１０１０ＧＢＴ１６８８６．１０２００５

ㅤㅤㅤㅤ

：，）

ＩＳＯ１０９９３１０２００２ＩＤＴ

／医疗器械生物学评价第部分：样品制备与参照样品（／—，

ＧＢＴ１６８８６．１２１２ＧＢＴ１６８８６．１２２００５

：，）

ＩＳＯ１０９９３１２２００２ＩＤＴ

／医疗器械风险管理对医疗器械的应用（／—，：，

ＹＹＴ０３１６ＹＹＴ０３１６２００３ＩＳＯ１４９７１１２０００

ＩＤＴ）

中华人民共和国药典二部（年版）

２００５

３术语和定义

下列术语和定义适用于本标准。

３．１

化学物质犮犺犲犿犻犮犪犾狊

生产过程的任何工序中或贮存期间添加或形成的物质，包括润滑剂、化学涂层和灭菌剂，这些物质

可从最终产品中检出。

３．２

内毒素犲狀犱狅狋狅狓犻狀狊

来源于革兰氏阴性菌细胞膜外层结构的脂多糖。

注：内毒素来源于原材料、生产过程中的工艺用水和手工处置过程中的细菌污染。

３．３

可溶出蛋白质犾犲犪犮犺犪犫犾犲狉狅狋犲犻狀狊

狆

从最终产品中溶出的不同分子量的水溶性蛋白质和肽。

注：蛋白质主要来源于天然橡胶胶乳。蛋白质和其他可能添加的蛋白质会在生产过程中发生变性和降解，水中浸

提出的蛋白质可引起型过敏反应。

Ｉ

１

／—

犢犢犜０６１６２００７

３．４

热原狉狅犲狀狊

狆狔犵

使家兔发热的物质，这些物质也能使人体产生发热反应和其他不良反应。

注：内毒素是热原的一种。

３．５

过程限值狉狅犮犲狊狊犾犻犿犻狋

狆

生产过程中可能产生的最高蛋白质含量。

４要求

４．１总则

一次性使用医用手套应按／进行评价，并应按照／进行风险分析。

ＧＢＴ１６８８６ＹＹＴ０３１６

４．２可溶出蛋白质

制造商应按５．１规定的方法监测含天然橡胶胶乳成品手套中可溶出蛋白质的过程限值。若有要

求，应能提供试验结果和所采用的试验方法。

本标准与风险分析相结合，用以确定污染物和残留物所涉及的生物学风险是否可以接受。

４．３内毒素

如果手套标示“低内毒素含量”，制造商应按５．２规定的方法监测无菌手套内毒素污染。有这种标

示的手套，每副手套的内毒素含量应不超过２０ＥＵ。

４．４化学物质

手套应不含有或不涂滑石粉（硅酸镁）。若有要求，制造商应说明生产过程中添加或产品中已知存

在的化学成分，如促进剂、抗氧化剂和杀菌剂等依据现有文献资料已知对健康有不良影响的物质。

４．５标示ㅤㅤㅤㅤ

除了其他相关规定的标示要求之外，初包装上至少还应给出下列内容：

ａ）由天然橡胶胶乳制成的医用手套应有以下文字或等效说明：

“（产品）含有会引起过敏反应的天然橡胶胶乳。”

ｂ）有粉手套应有以下文字或等效说明：

“注意：手术前应采用无菌操作法去除表面粉末，以使组织不良反应的风险降至最小。”

注：该注意事项可在内包装物上给出。

）制造商如标示含有蛋白质，应给出按规定测定的过程限值；

ｃ５．１

注：不允许标示蛋白质含量低于／。

１５０μｇｇ

注：尚未确定对胶乳过敏的人使用这种手套的安全性。

２

ｄ）不应标示“低变应原性”。

注：注意—给出的符号。

ＹＹ０４６６２００３

５试验方法

５．１可溶出蛋白质

测定可溶出蛋白质的方法应采用附录给出的改良法，或经与改良法比对确认过

ＡＬｏｗｒｙＬｏｗｒｙ

的方法，详见附录。

Ａ

注：现有确认过的用于可溶出蛋白质分析的其他方法（如附录给出的确认过的氨基酸分析法），只要能证明这些

１Ｃ

方法经过确认，并与本标准规定的标准方法有对应关系就允许采用，但这些方法不适合用于常规质量控制。

注：蛋白质免疫学测定法还处在发展过程中（参见附录）。

２Ｂ

５．２内毒素

除非鲎试剂（）试验中出现无法排除的干扰现象，对方法的选择、确认和使用应符合《中华人民

ＬＡＬ

共和国药典》（以下简称《中国药典》）规定的细菌内毒素检查法或具有相同灵敏度和重现性的ＬＡＬ试

２

／—

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验方法。ＬＡＬ试验中如出现无法排除的干扰，不能准确测出细菌内毒素水平，这种情况下可以采用《中

国药典》中规定的兔热原试验。试验结果应表示为每副手套含内毒素单位（）。

ＬＡＬＥＵ

每批产品都应进行试验。推荐的手套最小检验量根据批量确定。批量少于副时，取样量为两

３０

副；批量在副副之间时，取样量为副；批量超过副时，取样量为，但最大取样量为

３０～１００３１００３％

１０副。

每副手套的外表面用４０ｍＬ无内毒素水（《中国药典》中规定的细菌内毒素检查用水）在３７℃～

４０℃下浸提４０ｍｉｎ６０ｍｉｎ，浸提过程中要保证手套的整个外表面与浸提介质接触。必要时将浸提液

～

以２０００犵离心１５ｍｉｎ，以除去微粒。离心后取出浸提液立即进行内毒素试验。

注：其他现有公认的内毒素分析方法，只要经过确认并与本标准所规定的方法具有相关性，也可用来进行常规质量

控制。

６试验报告

试验报告至少应包括下列信息：

———本标准编号；

———手套类型和生产批号；

———制造商或供应商和试验室（如果不同）名称和地址；

———试验日期；

———所用试验方法的描述；

———试验结果。

ㅤㅤㅤㅤ

３

／—

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附录犃

（规范性附录）

用改良犔狅狑狉狔分析法测定天然橡胶手套水溶性蛋白质的方法

犃．１范围

本法用于天然橡胶制成的医用手套内水溶性蛋白质总量的测定，本法已经在实验室间进行的比对

试验中得到了确认。本法定量测定蛋白质低限值约为每克手套１０μｇ（即每毫升浸提液２μｇ蛋白质）。

像表面活性剂、促进剂和抗氧化剂等在手套生产过程中添加到天然橡胶中的化学物质会对显色过

程有干扰作用，有些物质可能会降低显色，而有些物质可能会增强显色。如果在试验中因干扰导致出现

误差，则可以采用任何经确认过的氨基酸分析方法（如附录给出的方法）。

Ｃ

注：使用该方法的人员应熟悉实验室一般规程。该方法没有涉及安全问题，如使用方法涉及该类问题，使用者有责

任建立相应的安全与卫生规程，并确保与国家规定的要求相一致。

犃．２原理

水溶性蛋白质被浸提到一种缓冲溶液中，然后加入脱氧胆酸钠，用酸使其沉淀、浓缩并将其从水溶

性物质（可能对测定有干扰）中分离。沉淀出的蛋白质重新溶解于碱中，并用改良Ｌｏｗｒｙ法比色定量。

分析的原理是基于蛋白质与铜和Ｆｏｌｉｎ试剂在碱性介质中反应呈现蓝色的特征，用分光光度计在

６００ｎｍ７５０ｎｍ波长范围内测量。

～

犃．３试剂ㅤㅤㅤㅤ

犃．３．１总则

试验用水应为二次蒸馏水或相同质量的水，所有试剂应为分析纯。

犃．３．２浸提介质

犃．３．２．１三（羟甲基）甲基氨基乙烷磺酸（），半钠盐（）。

犖２ＴＥＳｈｅｍｉｓｏｄｉｕｍｓａｌｔ

注：英文名称为［］（）。

犖ｔｒｉｓＨｄｒｏｘｍｅｔｈｌｍｅｔｈｌ２ａｍｉｏｅｔｈａｎｅｓｕｌｆｏｎｉｃａｃｉｄＴＥＳ

ｙｙｙｙ

浸提缓冲液，用水溶解（）并稀释至，任何能使手套浸提液的值保

犃．３．２．２２４ＴＥＳＡ．３．２．１１ＬＨ

ｇｐ

持在７．４±０．２的等效的缓冲系统都可以使用。

注：制备足量的手套浸提液（）、蛋白质标准液（）和空白液。

Ａ．６．２Ａ．６．３．２

染色液，溴酚蓝的钠盐溶液，用水溶解溴酚蓝并稀释至，保存周。

犃．３．２．３１００ｍ１Ｌ４

ｇ

犃．３．３犔狅狑狉蛋白质分析试剂盒

狔

［］）

１９１

注：该试剂盒可以采用现用的化学品制备，也可以购买成套试剂。本标准的方法是用成套试剂进行确认。

试剂，铜试剂（碱性酒石酸铜或柠檬酸铜溶液）。

犃．３．３．１Ａ

试剂，稀释的试剂。

犃．３．３．２ＢＦｏｌｉｎ

犃．３．４氢氧化钠溶液，［（）／］。

犮ＮａＯＨ＝０．１ｍｏｌＬ

脱氧胆酸钠（），用水溶解脱氧胆酸钠并稀释至。溶液制备后保存周。

犃．３．５ＤＯＣ０．１５１００ｍＬ４

ｇ

三氯乙酸（），／水溶液，用水溶解并稀释成即得。溶液制备

犃．３．６ＴＣＡ４．４ｍｍｏｌＬ７２ＴＣＡ１００ｍＬ

ｇ

后保存周。

４

犃．３．７磷钨酸（），用水溶解并稀释至。溶液制备后保存周。

ＰＴＡ７２ＰＴＡ１００ｍＬ４

ｇ

）蛋白质成套分析试剂（分类号为）可从实验室购得，地点：

１ＬｏｗｒＭｉｃｒｏＤＣ５０００１１６ＢｉｏＲａｄ２０００ＡｌｆｒｅｄＮｏｂｅｌ

ｙ

，，，。这一信息仅为本标准的使用者提供便利，并不意味着对这一产品的

ＤｒｉｖｅＨｅｒｃｕｌｅｓＣＡ９４５６５４７ＵＳＡＣＥＮ

认可。

４

／—

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２）

犃．３．８卵清蛋白，从冻干的鸡蛋中提取，无盐。

犃．４仪器

犃．４．１合成手套，无粉。

犃．４．２离心机，离心力至少可达到６０００。

犵

离心试管，或聚丙烯试管，试管的蛋白质吸附量每管不超过，不要使用玻璃

犃．４．３３０ｍＬ５０ｍＬ１０

μｇ

器具，因其表面吸附蛋白质。

注：第Ａ．５章给出了一种测定蛋白质吸附量的方法。

犃．４．４滤膜，一次性使用，孔径为０．２２ｍ，每个滤膜的蛋白质吸附量不超过１０ｇ。

μμ

注：第Ａ．５章给出了一种测定蛋白质吸附量的方法。

注射器，一次性使用，，用聚乙烯或聚丙烯材料制造。

犃．４．５２０ｍＬ

微型试管，，用聚丙烯材料制造。

犃．４．６２ｍＬ

石英比色池，。

犃．４．７１ｃｍ

犃．４．８酶标板，孔，平底，用聚苯乙烯材料制造，或一次性板池（）。

９６Ａ．４．９

犃．４．９一次性板池，半微型，，用聚苯乙烯材料制造。

１．５ｍＬ１ｃｍ

犃．４．１０酶标仪，波长范围６００ｎｍ７５０ｎｍ。

～

犃．４．１１分光光度计，波长范围２３０ｎｍ７５０ｎｍ。

～

犃．４．１２涡旋式混合器。

犃．４．１３微量移液器，带有一次性聚丙烯吸头。

犃．４．１４夹具，用于浸提过程中密封手套防止漏水。推荐使用衬有泡沫橡胶可旋紧的铝质夹具（见

图Ａ．１），或１７０ｍｍ长的血液透析塑料夹具。

ㅤㅤㅤㅤ

———外手套；

１

２———内手套；

３———浸提缓冲液；

４———染色溶液；

———手套夹具。

５

图犃．１手套浸提

）该卵清蛋白是用鲜鸡蛋白通过在下用硫酸铵分馏和反复结晶制得。如、鸡蛋白，级，可从

２Ｈ４．５ＳｉｍａＡ５５０３Ｖ

ｐｇ

，，，购得。这一信息仅为本标准的使用者提供便

ＳｉｍａｒＣｈｅｍｉｃａｌＣｏ．Ｐ．Ｏ．Ｂｏｘ１４５０６ＳｔＬｏｕｉｓＭＯ６３１７８ＵＳＡ

ｇ

利，并不意味着ＣＥＮ对这一产品的认可。

５

／—

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犃．４．１５振荡器。

犃．５蛋白质吸附量测定

犃．５．１总则

推荐使用一次性聚丙烯器具（聚丙烯被认为具有低蛋白质结合力）。在使用一批新的离心试管或过

滤装置以前，应使用下列方法检查其蛋白质结合力。试验应在１ｄ之内进行。

犃．５．２离心试管的蛋白质吸附量

在离心试管（）中加含／卵清蛋白的标准溶液，标准溶液的配制方法是

犃．５．２．１Ａ．４．３３０ｍＬ１０ｍＬ

μｇ

用浸提缓冲液（）稀释蛋白质储备液（）。

Ａ．３．２．２Ａ．６．３．１

移取卵清蛋白溶液（）至新的离心试管中，在振荡器（）上振荡。确保

犃．５．２．２１０ｍＬＡ．５．２．１Ａ．４．１５

试管所有表面被溶液浸润，后再将此管溶液移至另外一个试管中振荡。以此步骤浸润支试管