GBZ/T(卫生) 240.17-2011 化学品毒理学评价程序和试验方法 第17部分：亚急性吸入毒性试验

ICS13.100

C52

中华人民共和国国家职业卫生标准

/—

GBZT240.172011

化学品毒理学评价程序和试验方法

:

第部分亚急性吸入毒性试验

17

ㅤㅤㅤㅤ

—

Proceduresandtestsfortoxicoloicalevaluationsofchemicals

g

:

Part17Sub-acuteinhalationtoxicittest

y

2011-08-19发布2012-03-01实施

中华人民共和国卫生部发布

/—

GBZT240.172011

化学品毒理学评价程序和试验方法

:

第部分亚急性吸入毒性试验

17

1范围

/(/)、、

GBZT240的本部分规定了啮齿类动物亚急性吸入14d28d毒性试验的试验目的试验概述

、、。

试验方法数据处理与结果评价评价报告和结果解释

(/)。

本部分适用于检测化学品亚急性吸入14d28d毒性

2规范性引用文件

。,

下列文件对于本文件的应用是必不可少的凡是注日期的引用文件仅所注日期的版本适用于本

。,()。

文件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于本文件

/职业卫生名词术语

GBZT224

/:

化学品毒理学评价程序和试验方法第部分总则

GBZT240.11

3术语和定义

ㅤㅤㅤㅤ

/确立的术语和定义适用于本文件。

GBZT240.1

3.1

蓄积毒性accumulativetoxicit

y

,:

受试样品在体内蓄积引起的有害效应蓄积有两种形式

),,体内逐渐

a物质蓄积即长期反复接触受试样品时由于吸收速度超过消除速度导致的该物质在

增多;

),,,

b功能蓄积即受试样品虽然在体内的代谢和排出速度较快但其造成的损伤恢复慢在前一次

,。

的损伤未恢复前又发生新的损伤如此残留损伤的累积称为功能蓄积

4试验目的

,

为确定一定时期内反复多次吸入染毒受试样品而引起的健康危害以明确化学品对动物的蓄积作

,,、

用及其靶器官并确定其最大无作用剂量和最低有作用剂量为亚慢性慢性毒性或致癌试验的剂量设

计提供依据。

5试验概述

,,。

实验动物分成几个吸入浓度梯度的组别每组一个浓度连续吸入染毒或染毒期间每

14d28d

,、。

日密切观察动物的毒性反应期间死亡濒死或试验结束被处死的动物要进行解剖

,,

由于与重复吸入试验除在染毒时间长短上和临床及病理结果程度上有所不同外余者

14d28d

,,。

基本相同二者同属短期试验因此本部分适用于以上两个试验

1

/—

GBZT240.172011

6试验方法

6.1受试样品处理

,,。

尽量使用物理方法使受试样品能在空气中保持一定浓度并能持续较长的时间必要时使用无

、。

毒不与受试样品反应并不影响受试样品吸收的介质

6.2实验动物和饲养环境

6.2.1实验动物

,,。

可使用多种实验动物首选大鼠一般选用周周龄的大鼠实验动物应是常规实验动物品系

6~8

。,。

的健康年轻动物染毒开始时动物体重的差异不得超过平均体重的20%

6.2.2饲养环境

,,

动物可单笼饲养或按性别群养大鼠群养时每笼不超过只以不干扰动物个体活动及观察反应为

5

。。

度动物实验室应符合国家相应规定

6.3剂量设计

。,

动物应随机分配到试验组与对照组中试验至少设三个剂量组和一个对照组还可增设一个附加

。()。,。

组每组至少应有只雌雄各半皮肤健康的动物若计划在试验过程中处死动物应增加动物数

10

,

高染毒剂量的设计应为引起动物明显毒效应但不造成动物死亡中剂量应引起较轻的可观察到的毒性

ㅤㅤㅤㅤ

,。。

效应低剂量应不出现任何毒效应剂量组的剂量间距以倍倍为宜对照组除不接触受试样品

2~4

,。,。

外其他处理应与染毒组完全相同必要时可设介质对照组以研究介质的影响对照组中介质的浓度

。,,

可采用高浓度组的介质用量如染毒后出现严重的呼吸道刺激症状则应降低受试样品的浓度即使高

,。

剂量组由于浓度的降低导致了其他毒性反应的明显下降或消失也应如此如试验初就出现严重呼吸

,。

道刺激症状应停止试验并以较低浓度进行新的试验

,。

如受试样品具有爆炸性所用浓度应低于其爆炸浓度

6.4染毒装置

。,,

亚急性吸入毒性试验应采用动式染毒设备染毒时染毒柜内应每小时换气次次含氧量

12~15

,。,。

应为19%染毒气体在柜内应分布均匀应使柜内保持轻度负压状态以防止受试样品从柜内逸出

,,

染毒柜内动物应避免过于拥挤尽量使其暴露于受试样品动物的总体积不应超过染毒柜总容积的

。,。

为避免经口和经皮接触也可采用仅口鼻或仅头部暴露的方式

5%-

,

应在试验前确定和建立柜内空气中受试样品浓度的监测控制方法和空气流量调节以保证整个设

备的条件基本一致。

、、、、、,

染毒过程中应进行染毒柜中气流流速温度湿度受试样品浓度颗粒物粒度分散度的测定并保

持试验中上述各因素水平恒定。

,。

染毒时装置内温度最好保持在22℃±2℃相对湿度为40%~70%但有时由于受试样品状态

(),,。

如气溶胶的要求此条件可适当变化并注明

6.5染毒方法的选择

,,。

6.5.1气体受试样品经流量计与空气混合成设计浓度后直接输入染毒柜

,。

6.5.2易挥发液体受试样品通过空气鼓泡或适当加热促使挥发后输入染毒柜

2

/—

GBZT240.172011

、,。

6.5.3对一些液体固体粉末采用适当方式雾化成气溶胶后输入染毒柜

6.6试验步骤

,,,

取已在试验室适应环境至少3d的实验动物称重然后放入染毒柜中染毒除有特殊要求外一般

。。,。

应每日吸入染毒柜内受试样品浓度恒定后开始染毒吸入染毒每周连续染毒或考

6h7d1428d

,。。

虑到实际工作情况也可每周染毒5d在染毒期间应停止供食供水

6.7临床观察

/,,、、、、

观察期限一般为14d28d每天观察一次观察并记录皮肤被毛眼黏膜的改变和呼吸系统循

、、、、,

环系统神经系统肢体活动行为方式等变化发生的时间程度和持续时间特别注意观察并记录呼吸

。,

系统的变化如发现动物死亡或濒危应及时解剖或冷藏后解剖检查以减少动物同类互残及死后组织

。,。

自溶每日测量一次饲料消耗量每周测体重一次

6.8临床检查

6.8.1血液学检查

、、、,

试验结束时测定血红蛋白浓度红细胞数白细胞总数和分类红细胞压积等必要时测定凝血功能

如凝血时、、。

间凝血酶原时间凝血激酶时间或血小板等指标

,。

血液标本应在专用实验室采取并在适当条件下储存

6.8.2临床血液生化检查

ㅤㅤㅤㅤ

。()、

在试验结束时进行检查指标主要包括丙氨酸氨基转移酶ALT天门冬氨酸氨基转移酶

()、()、()、()、()。、()、

AST尿素氮BUN肌酐Cr白蛋白Alb总蛋白TP如有必要还应做电解质平衡钙Ca

()、()、()、()、()()、()。

磷P氯Cl钠Na钾K空腹血糖Glu禁食时间要适当碱性磷酸酶ALP与总胆红素在

,,、、、

某些情况下还须检测与肝或其他器官有关的酶和胆酸以及酯类化合物激素高铁血红蛋白胆碱酯

()。,。

酶ChE活性等分析如出现肉眼可见的脏器改变可增加与之相应的血液生化指标还可增加其他

脏器以进一步对观察到的毒性反应进行研究。

6.8.3尿液检查

,、、、。

一般应进行尿液的常规检查包括外观pH值尿蛋白尿糖和血细胞如尿样分析可作为预期或

,的尿液检查项目。

观察得到的毒性指标则可增加有关

6.8.4大体解剖

,、,、、。、、

所有动物皆应进行大体解剖内容应包括体表体腔的各开口处颅胸腹腔及其内容物肝肺

、、()、、、、,,

肾肾上腺睾丸卵巢附睾脾脑心脏应在分离后尽快称重以防水分丢失并应立即保存在固定液

,。

中备病理组织学检查

、、、、、、(/)

心肝脾肺肾脑睾丸的绝对重量和脏器系数脏器系数脏器重量体重为必测指

=×100%

,。。

标必要时加测其他脏器绝对重量和脏器系数应详细检查呼吸道的损害情况

6.8.5病理组织学检查

,:

凡符合以下条件的皆应进行重要脏器的组织病理学检查特别是对呼吸系统的检查

)、、

a所有高剂量组和对照组动物的肝肺肾及染毒区及非染毒区皮肤等重要的和可能受到损伤的

/—1

GBZT240.1720111

0

—

2

器官或组织;

),7

b如高剂量组动物的器官或组织有组织病理学病变时则应扩展至其他剂量组的相应器官和组1.

;;

织各剂量组大体解剖有异常的器官和组织0

4

)附加组动物的被其他试验组证明有病变的器官和组织。

c2

/

T

7数据处理与结果评价Z

B

G

7.1数据处理

,:、、

试验结果以表格形式总结内容包括各组动物数出现损伤的动物数损伤的类型和每种损伤动物

。。

的百分比采用适当的统计学方法进行统计

7.2结果评价

、、、,/

综合临床观察临床检查大体解剖组织病理学检查的结果对受试样品吸入14d28d染毒有无

,、;

毒作用及其毒作用特点包括受试样品的靶器官蓄积毒性等做出初步评价对是否需要进行更长时间

。

的毒理学试验及其剂量和观察指标提出建议如发现试验组与对照组有显著性差异或能得出剂量效

-

,。

应或剂量反应曲线时应对和作出初步评价

-NOAELLOAEL

8评价报告

/,:

除GBZT240.1规定的一般项目外评价报告还应包括以下内容

ㅤㅤㅤㅤ

)、、

a受试样品及介质的有关理化特性受试样品的给予方法及浓度染毒柜中实际测得的受试样品

、(、、);

浓度用标准方法测得的受试样品颗粒物粒度和分散度均要求均数标准差变异系数

)、、;

b试验环境所用设备及其他条件如试验时染毒柜中温湿度气流流速等的介绍

)、、、,;

c各组动物染毒开始时间结束时间染毒方式毒物浓度及测定方法的介绍染毒过程的描述

),、,

d观察次数及持续时间分性别和观察组描述观察中发现症状出现消失的时间对症状特点的

,,,

文字描述动物体重及变化动物死亡及剖检的时间大体解剖及病理检查所见病变特点的详

,,;

细文字描述血液及生化结果并附参考正常值食物消耗量

)、;

e统计学分析方法及各种效应的频数发生率或均值及标准差的计算结果

)有可能时绘出剂量效应或剂量反应曲线。

f--

9结果解释

(/)。。

本项试验结果可提供亚急性吸入14d28d染毒的毒作用资料其结果外推至人的有效性有限