GBZ/T(卫生) 240.5-2011 化学品毒理学评价程序和试验方法 第5部分：急性眼刺激性/腐蚀性试验

ICS13.100

C52

中华人民共和国国家职业卫生标准

/—

GBZT240.52011

化学品毒理学评价程序和试验方法

:/

第部分急性眼刺激性腐蚀性试验

5

ㅤㅤㅤㅤ

—

Proceduresandtestsfortoxicoloicalevaluationsofchemicals

g

:/

Part5Acuteeeirritationcorrosiontest

y

2011-08-19发布2012-03-01实施

中华人民共和国卫生部发布

/—

GBZT240.52011

化学品毒理学评价程序和试验方法

:/

第部分急性眼刺激性腐蚀性试验

5

1范围

//、、、

GBZT240的本部分规定了动物急性眼刺激腐蚀性试验的目的试验概述试验方法数据处理

、。

与结果评价评价报告和结果解释

/。

本部分适用于检测化学品的眼睛刺激性腐蚀性作用

2规范性引用文件

。,

下列文件对于本文件的应用是必不可少的凡是注日期的引用文件仅所注日期的版本适用于本

。,()。

文件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于本文件

/职业卫生名词术语

GBZT224

/:

化学品毒理学评价程序和试验方法第部分总则

GBZT240.11

3术语和定义

ㅤㅤㅤㅤ

/界定的术语和定义适用于本文件。

GBZT240.1

4试验目的

/。

确定评价化学品对哺乳动物眼睛是否有刺激作用腐蚀作用及其程度

5试验概述

,

受试样品以一次剂量加入每只实验动物的一侧眼睛结膜囊内以未作处理的另一侧眼睛作为自身

;,,

对照在规定的时限内观察对动物眼睛的刺激和腐蚀作用程度并评分以此评价受试样品对眼睛的刺

。。,

激作用观察时间应能足以评价刺激效应的可逆性和不可逆性观察时间最少72h但一般不超过

;,;()

21d当动物出现严重和持久的痛苦迹象时以适当的方式将动物处死强酸物质pH≤2或强碱物质

(),,;

pH≥11由于其可预见的腐蚀特性不必做本试验已在皮肤试验中证实具有腐蚀或严重刺激毒性的

;

物质不必进行眼刺激试验在充分并公认的体外试验结果中确定可能产生刺激性或腐蚀性的物质不必

进行体内试验。

6试验方法

6.1受试样品处理

,,。

对于液态受试样品一般不需稀释可直接使用原液若受试样品为不溶性或难溶固体或颗粒状物

,,。,。

质应将其研磨成细粉状过74m孔径筛气溶胶产品需喷至容器中收集其液体再使用对挥发性

μ

1

/—

GBZT240.52011

,。

物质剂量可以通过使用前后称量容器质量进行估算

6.2实验动物和饲养环境

6.2.1动物种属

,。,

首选健康成年白色家兔体重2000~3000如果使用其他的哺乳动物做试验试验者应提供

gg

选择的依据。

6.2.2动物数量

,。

如果受试样品有可预见的严重的刺激性和腐蚀性效应可以考虑先用只动物如果用只动物

11

,。,

试验得出的结果提示受试样品有刺激或腐蚀作用则不必进行进一步的试验如果结果相反则至少需

要只动物。

3

6.2.3饲养环境

。,。

动物实验室应符合国家相应规定常规饲料喂养自由饮水

6.3剂量设计

。,。

液态受试样品染毒量为0.1mL若受试样品为固态难溶颗粒状染毒量应为100mg

6.4试验步骤

6.4.1试验前眼睛的检查

ㅤㅤㅤㅤ

。,

试验前动物要在动物实验室环境中至少适应3d试验前24h要对实验动物的两只眼睛进行常规

。、。

检查有眼睛刺激症状角膜缺陷或结膜损伤的动物不能用于试验

6.4.2染毒

,()()

6.4.2.1轻轻拉开实验动物一侧眼睛的下眼睑将受试样品0.1mL或100mg滴入或放入结膜囊

,、,。。

中使上下眼帘被动闭合1s以防止受试样品丢失未处理的另一侧眼睛作为自身对照

(),,。

6.4.2.2滴入或放入受试样品24h内不冲洗眼睛如果认为必要在24h时可进行冲洗

,,

根据表的评价标准如果受试样品出现中度以上刺激性时必要时可另选只动物进行冲

6.4.2.323

:(),,

洗试验滴入或放入受试样品闭合1s30s后用生理盐水冲洗5min水的流量和流速都不应导致眼

损伤。

6.4.3观察周期

,。。

观察时间最少72h但应足以评估观察到可逆或不可逆效应观察时间一般不超过21d

6.4.4临床检查和评分

(),,,,

6.4.4.1在滴入或放入受试样品后的第1h24h48h72h对眼睛进行检查如果72h时未出现刺

,。,,

激反应可终止试验如果发现累及角膜或有其他眼刺激作用7d内不恢复者为确定该损害的可逆性

或不,。、。、、

可逆性需延长观察时间一般不超过观察时间点一般为和除了对角膜虹膜

21d4d7d21d

,。,

结膜进行观察外其他损害效应都应记录并报告在24h观察和记录结束后可使用荧光素钠对所有

。,

动物的眼睛作进一步检查在每次检查中均应按表记录眼的刺激反应并按表进行眼刺激强度

12

评价。

2

/—

GBZT240.52011

,、。

6.4.4.2在进行检查时可使用放大镜裂隙灯

表1眼各部位损伤评分表

损伤情况评分

无混浊0

,

散在或弥漫性混浊虹膜清晰可见1

,

O混浊程度半透明区易分辨虹膜轻度模糊不清2

(以最致密部位为准)

,,

出现灰白色半透明区虹膜模糊不清瞳孔大小勉强

3

可见

角膜

,

角膜混浊虹膜无法辨认4

/

<141

//

A角膜受损范围14~122

(出现任何浑浊的总面积)//43

12~3

/

34~14

角膜损伤加权积分=O×A×5最高积分为80

正常

0

、、、(

皱褶明显加深充血水肿角膜周围有充血出现任何

1

),

虹膜I虹膜损伤一项或任何二项对光反应迟钝

ㅤㅤㅤㅤ

、、(

对光反应消失出血肉眼可见严重损伤出现其中一项

2

或全部)

虹膜损伤加权积分=I×5最高积分为10

血管正常0

,

R充血血管充血呈鲜红色1

()

指睑结合膜和球结膜,,

血管充血呈深红色个别血管难以辨认2

,

弥漫性充血呈深紫红色3

无水肿0

轻微水肿伴部分眼睑外翻1

结膜S水肿明显水肿伴部分眼睑外翻2

水肿至眼睑近半闭合3

水肿至眼睑超过半闭合4

无0

()

少量分泌物不包括动物内眦少量分泌物1

D分泌物

分泌物使眼睑和睫毛潮湿或粘着2

分泌物使整个眼区潮湿或粘着3

结膜损伤加权积分()最高积分为

=R+S+D×220

、

角膜虹膜和结膜反应累加最高积分为110

3

/—

GBZT240.52011

表2眼刺激强度评价标准

染毒后天内刺激反应持续时间

4

刺激强度

()

最高总积分平均值总积分平均值

第天无刺激性

0~1≥0

第天轻刺激性

2.5~2≥0

第天轻刺激性

4=0

15~

第天中度刺激性

4>0

第天,中度刺激性

7≤20半数以上动物第天

7≤10

,,

第天半数以上动物第天但是无任何一只动物7d>30中度刺激性

7≤207>10

25~

,,

第天半数以上动物第天而且有一只动物7d>30重度刺激性

7≤207>10

第天重度刺激性

7>20

50~重度刺激性

7数据处理与结果评价

ㅤㅤㅤㅤ

7.1数据处理

,,。

数据应以表格形式汇总记录观察期内每只动物的刺激评分直到症状消失或21d试验结束详

,,。

细描述刺激的程度和性质严重损害的出现以及观察到的除眼以外的任何效应

7.2结果评价

。

眼刺激评分应与观察到的反应的性质和可逆性或其他方面结合进行评价单独的积分值不能作为

,。

受试样品的刺激性质的最后评判应将所有观察结果及各种因素进行综合评价

8评价报告

,:

除GBZ240.1规定的一般项目外评价报告还应包括以下内容

)(,,,,,);

表格记录每只动物每个时间点如和的刺激反应

a1h24h48h72h4d7d21d

)具体描述除眼部以外的其他作用;

b

)/;

c刺激腐蚀程度和性质的描述

)(、、);

d描述在各观察时点积分时的检查方法如裂隙灯生物显微镜荧光素染色

)结论。

e

4

/—

GBZT240.52011

9结果解释

。

急性眼刺激试验结果从动物外推到人的可靠性很有限白色家兔在大多数情况下对有刺激性或腐

。,

蚀性的物质较人类敏感若用其他品系动物进行试验时也得到类似结果则会增加从动物外推到人的

可靠性。

ㅤㅤㅤㅤ

5