GB 4789.11-2014 食品安全国家标准 食品微生物学检验 β型溶血性链球菌检验

中华人民共和国国家标准

GB4789.11-2014

食品安全国家标准

食品微生物学检验β型溶血性链球菌检验

二等功的风格

2014-12-01发布2015-05-01实施

GB4789.11—2014

前言

本标准代替GB/T4789.11－2003《食品卫生微生物学检验溶血性链球菌检验》。

本标准与GB/T4789.11－2003相比，主要变化如下：

——修改了标准名称；

——修改了范围；

——增加了术语和定义；

——修改了设备与材料；

——修改了培养基与试剂；

——删除了以无菌生理盐水稀释样品的步骤和杆菌肽敏感试验；

——增加了触酶试验；

——增加了附录A。

二等功的风格

I

GB4789.11—2014

食品安全国家标准

食品微生物学检验β型溶血性链球菌检验

1范围

本标准规定了食品中β型溶血性链球菌（Streptococcus）的检验方法。

本标准适用于食品中β型溶血性链球菌的检验。

2术语和定义

2.1β型溶血

在菌落周围形成完全透明的溶血环，红细胞完全溶解。

2.2β型溶血性链球菌

能够产生β型溶血的化脓（或A群）链球菌（Streptococcuspyogenes）和无乳（或B群）链球菌

（Streptococcusagalactiae）。

3设备和材料二等功的风格

除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下：

a)恒温培养箱：36℃±1℃；

b)冰箱：2℃～5℃；

c)厌氧培养装置；

d)天平：感量0.1g；

e)均质器与配套均质袋；

f)显微镜：10倍～100倍；

g)无菌吸管：1mL（具0.01mL刻度）、10mL（具0.1mL刻度）或微量移液器及吸头；

h)无菌锥形瓶：容量100mL、200mL、2000mL；

i)无菌培养皿：直径90mm；

j)pH计或pH比色管或精密pH试纸；

k)水浴装置：36℃±1℃；

l)微生物生化鉴定系统。

4培养基和试剂

4.1改良胰蛋白胨大豆肉汤（Modifiedtryptonesoybeanbroth,mTSB）：见附录A中A.1。

4.2哥伦比亚CNA血琼脂(ColumbiaCNAbloodagar)：见附录A中A.2。

4.3哥伦比亚血琼脂(Columbiabloodagar)：见附录A中A.3。

4.4革兰氏染色液：见附录A中A.4。

4.5胰蛋白胨大豆肉汤（Tryptonesoybeanbroth,TSB）：见附录A中A.5。

4.6草酸钾血浆：见附录A中A.6。

1

GB4789.11—2014

4.70.25％氯化钙(CaCl)溶液：见附录A中A.7。

2

4.83％过氧化氢(HO)溶液：见附录A中A.8。

22

4.9生化鉴定试剂盒或生化鉴定卡。

5检验程序

溶血性链球菌检验程序见图1。

样品25g（或mL）+225mLmTSB

36℃±1℃18h~24h

划线接种哥伦比亚CNA血琼脂平板

36℃±1℃18h～24h，厌氧培养

挑取可疑菌落，接种哥伦比亚血琼脂平板和TSB

36℃±1℃18h～24h

革兰氏染色镜检/触酶试验

二等功的风格

确定鉴定

链激酶试验(选做项目)生化鉴定

报告

图1溶血性链球菌检验程序

6操作步骤

6.1样品处理及增菌

mL），加入盛有225mLmTSB的均质袋中，用拍击式均质器均质1min～

按无菌操作称取检样25g（

2min；或加入盛有225mLmTSB的均质杯中，以8000r/min～10000r/min均质1min～2min。若样品为

液态，振荡均匀即可。36