GB 4789.40-2016 食品安全国家标准 食品微生物学检验 克罗诺杆菌属(阪崎肠杆菌)检验

中华人民共和国国家标准

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GB4789.402016

食品安全国家标准

食品微生物学检验

()

克罗诺杆菌属阪崎肠杆菌检验

2016-12-23发布2017-06-23实施

中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会

发布

国家食品药品监督管理总局

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GB4789.402016

前言

本标准代替—《食品安全国家标准食品微生物学检验阪崎肠杆菌检验》、

GB4789.402010

/—《():》。

出口奶粉中阪崎肠杆菌克罗诺杆菌属检验方法第部分分离与计数

SNT1632.120131

—,:

本标准与GB4789.402010相比主要变化如下

———“(

标准名称修改为食品安全国家标准食品微生物学检验克罗诺杆菌属阪崎肠杆

)”;

菌检验

———修改了可疑菌落的挑取数量。

Ⅰ

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GB4789.402016

食品安全国家标准

食品微生物学检验

()

克罗诺杆菌属阪崎肠杆菌检验

1范围

本标准规定了食品中克罗诺杆菌属()的检验方法。

Cronobacter

、。

本标准适用于婴幼儿配方食品乳和乳制品及其原料中克罗诺杆菌属的检验

2设备和材料

,:

除微生物实验室常规灭菌及培养设备外其他设备和材料如下

恒温培养箱:,,。

2.125℃±1℃36℃±1℃44℃±0.5℃

冰箱:。

2.22℃~5℃

恒温水浴箱:。

2.344℃±0.5℃

:。

2.4天平感量0.1g

2.5均质器。

2.6振荡器。

:()、()。

无菌吸管具刻度具刻度或微量移液器及吸头

2.71mL0.01mL10mL0.1mL

:、、。

2.8无菌锥形瓶容量100mL200mL2000mL

:。

2.9无菌培养皿直径90mm

2.10H计或H比色管或精密H试纸。

ppp

2.11全自动微生物生化鉴定系统。

3培养基和试剂

(,):。

3.1缓冲蛋白胨水bufferetonewaterBPW见A.1

pp

改良月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤万古霉素(

3.2-modifiedlaurlsulfatetrtosebroth-vancomcin

yypy

,):。

mediummLST-Vm见A.2

3.3阪崎肠杆菌显色培养基。

(,):。

3.4胰蛋白胨大豆琼脂trticasesoaarTSA见A.3

ypyg

3.5生化鉴定试剂盒。

:。

3.6氧化酶试剂见A.4

:。

赖氨酸脱羧酶培养基见

3.7L-A.5

:。

鸟氨酸脱羧酶培养基见

3.8L-A.6

:。

精氨酸双水解酶培养基见

3.9L-A.7

:。

3.10糖类发酵培养基见A.8

:。

3.11西蒙氏柠檬酸盐培养基见A.9

1

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GB4789.402016

第一法克罗诺杆菌属定性检验

4检验程序

克罗诺杆菌属检验程序见图1。

图克罗诺杆菌属检验程序

1

5操作步骤

5.1前增菌和增菌

(),,

取检样100mL置灭菌锥形瓶中加入900mL已预热至44℃的缓冲蛋白胨水用手缓缓地摇

g

动至充分溶解,培养。移取转种于肉汤,

36℃±1℃18h±2h1mL10mLmLST-Vm44℃±0.5℃

培养24h±2h。

5.2分离

,,

轻轻混匀肉汤培养物各取增菌培养物环分别划线接种于两个阪崎肠杆菌显色

5.2.1mLST-Vm1

,,,

培养基平板显色培养基须符合GB4789.28的要求36℃±1℃培养24h±2h或按培养基要求条件

2

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GB4789.402016

培养。

,,。

挑取至少个可疑菌落不足个时挑取全部可疑菌落划线接种于平板培

5.2.255TSA25℃±1℃

养48h±4h。

5.3鉴定

,。。

自TSA平板上直接挑取黄色可疑菌落进行生化鉴定克罗诺杆菌属的主要生化特征见表1可

选择生化鉴定试剂盒或全自动微生物生化鉴定系统。

表1克罗诺杆菌属的主要生化特征

生化试验特征

黄色素产生+

氧化酶-

赖氨酸脱羧酶

L--

鸟氨酸脱羧酶()

L-+

精氨酸双水解酶

L-+

柠檬酸水解()

+

山梨醇()

D--

L-鼠李糖+

发酵蔗糖

D-+

蜜二糖

D-+

苦杏仁甙+

注:阳性;阴性;()阳性;()阴性。

+>99%->99%+90%~99%-90%~99%

6结果与报告

,()