GB 4789.43-2016 食品安全国家标准 食品微生物学检验 微生物源酶制剂抗菌活性的测定

中华人民共和国国家标准

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GB4789.432016

食品安全国家标准

食品微生物学检验

微生物源酶制剂抗菌活性的测定

2016-12-23发布2017-06-23实施

中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会

发布

国家食品药品监督管理总局

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GB4789.432016

食品安全国家标准

食品微生物学检验

微生物源酶制剂抗菌活性的测定

1范围

本标准规定了微生物源酶制剂抗菌活性的测定方法。

本标准适用于用微生物生产的酶制剂抗菌活性的测定。

2设备和材料

,:

除微生物实验室常规灭菌及培养设备外其他设备和材料如下

2.1生物安全柜。

冰箱:。

2.22℃~5℃

恒温培养箱:。

2.336℃±1℃

恒温水浴箱:。

2.446℃±1℃

:。

2.5天平感量为0.1g

2.6振荡器。

:()、()。

无菌吸管具刻度具刻度或微量移液器及吸头

2.71mL0.01mL10mL0.1mL

:。

2.8无菌培养皿直径90mm

:、。

2.9无菌锥形瓶容量250mL500mL

2.10H计或精密H试纸。

pp

:。

2.11无菌纸片见A.8

2.12无菌镊子。

:。

2.13游标卡尺刻度为0.1mm

3培养基和试剂

(,):。

3.1胰蛋白胨大豆琼脂TrtoneSoAarTSA见A.1

ypyg

(,):。

3.2胰蛋白胨大豆肉汤TrtoneSoBrothTSB见A.2

ypy

():。

平板计数琼脂见

3.3PlateCountAarA.3

g

/:。

见

3.40.1molLHClA.4

:。

3.5无菌生理盐水见A.5

/(,):。

3.650.0mL环丙沙星CirofloxacinCIP溶液见A.6

μgp

/:。

3.75.0μg片环丙沙星纸片见A.7

4试验菌株

金黄色葡萄球菌()。

4.1StahlococcusaureusATCC6538

py

1

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大肠埃希氏菌()。

4.2EscherichiacoliATCC11229

蜡样芽胞杆菌()。

4.3BacilluscereusATCC2

环状芽孢杆菌()。

4.4BacilluscirculansATCC4516

化脓性链球菌()。

4.5StretococcusoenesATCC12344

ppyg

粘质沙雷菌()。

4.6SerratiamarcescensATCC14041

5检验程序

微生物源酶制剂抗菌活性的测定检验程序见图1。

图微生物源酶制剂抗菌活性的测定检验程序

1

6操作步骤

6.1试验菌悬液原液制备

()、()、()、

将金黄色葡萄球菌ATCC6538大肠埃希氏菌ATCC11229蜡样芽孢杆菌ATCC2环状芽

()、()、()

孢杆菌ATCC4516化脓性链球菌ATCC12344粘质沙雷菌ATCC14041冻存菌株分别接种于

2

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盛有5mLTSB的试管置36℃±1℃培养18h~24h进行第一次传代培养分别挑取第一次传代培

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