GB 4789.40-2010 食品安全国家标准 食品微生物学检验 阪崎肠杆菌检验

中华人民共和国国家标准

GB4789.40—2010

食品安全国家标准

食品微生物学检验阪崎肠杆菌检验

Nationalfoodsafetystandard

Foodmicrobiologicalexamination：Enterobactersakazakii

2010-03-26发布2010-06-01实施

中华人民共和国卫生部发布

GB4789.40—2010

前言

本标准代替GB/T4789.40-2008《食品卫生微生物学检验阪崎肠杆菌检验》。

本标准与GB/T4789.40-2008相比，主要变化如下：

——修改了标准的中英文名称；

——删除了附录A中A.3。

本标准的附录A、附录B为规范性附录。

本标准所代替标准的历次版本发布情况为：

——GB/T4789.40-2008。

I

GB4789.40—2010

食品安全国家标准

食品微生物学检验阪崎肠杆菌检验

1范围

本标准规定了食品中阪崎肠杆菌（Enterobactersakazakii）的检验方法。

本标准适用于婴幼儿配方食品、乳和乳制品及其原料中阪崎肠杆菌的检验。

2设备和材料

除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下：

2.1恒温培养箱：25℃±1℃，36℃±1℃，44℃±0.5℃。

2.2冰箱：2℃～5℃。

2.3恒温水浴箱：44℃±0.5℃。

2.4天平：感量0.1g。

2.5均质器。

2.6振荡器。

2.7无菌吸管：1mL（具0.01mL刻度）、10mL（具0.1mL刻度）或微量移液器及吸头。

2.8无菌锥形瓶：容量100mL、200mL、2000mL。

2.9无菌培养皿：直径90mm。

2.10pH计或pH比色管或精密pH试纸。

2.11全自动微生物生化鉴定系统。

3培养基和试剂

：见附录A中A.1。

3.1缓冲蛋白胨水（bufferpeptonewater，BPW）

3.2改良月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤-万古霉素（modifiedlaurylsulfatetryptosebroth-vancomycin

medium，mLST-Vm）：见附录A中A.2。

3.3阪崎肠杆菌显色培养基。

3.4胰蛋白胨大豆琼脂（trypticasesoyagar，TSA）：见附录A中A.3。

3.5生化鉴定试剂盒。

3.6氧化酶试剂：见附录A中A.4。

3.7L-赖氨酸脱羧酶培养基：见附录A中A.5。

1

GB4789.40—2010

3.8L-鸟氨酸脱羧酶培养基：见附录A中A.6。

3.9L-精氨酸双水解酶培养基：见附录A中A.7。

3.10糖类发酵培养基：见附录A中A.8。

3.11西蒙氏柠檬酸盐培养基：见附录A中A.9。

2

GB4789.40—2010

第一法阪崎肠杆菌的检验

4检验程序

阪崎肠杆菌检验程序见图1。

检样100g（mL）

+BPW稀释液900mL

36℃±1℃，18h±2h

1mL+mLST-Vm10mL

44℃±0.5℃，24h±2h

阪崎肠杆菌显色培养基

36℃±1℃，24h±2h

挑取疑似菌落

TSA

25℃±1℃，48h±4h

挑取黄色菌落

生化鉴定

报告

图1阪崎肠杆菌检验程序

5操作步骤

5.1前增菌和增菌

取检样100g（mL）加入已预热至44℃装有900mL缓冲蛋白胨水的锥形瓶中，用手缓缓地摇动至

充分溶解，36℃±1℃培养18h±2h。移取1mL转种于10mLmLST-Vm肉汤，44℃±0.5℃培养24h±2

h。

5.2分离

5.2.1轻轻混匀mLST-Vm肉汤培养物，各取增菌培养物1环，分别划线接种于两个阪崎肠杆菌显色

3

GB4789.40—2010

培养基平板，36℃±1℃培养24h±2h。

5.2.2挑取1个～5个可疑菌落，划线接种于TSA平板。25℃±1℃培养48h±4h。

5.3鉴定

自TSA平板上直接挑取黄色可疑菌落，进行生化鉴定。阪崎肠杆菌的主要生化特征见表1。可选

择生化鉴定试剂盒或全自动微生物生化鉴定系统。

表1阪崎肠杆菌的主要生化特征

生化试验特征

黄色素产生＋

氧化酶－

L-赖氨酸脱羧酶－

L-鸟氨酸脱羧酶（＋）

L-精氨酸双水解酶＋

柠檬酸水解（＋）

D-山梨醇（－）

L-鼠李糖＋

发酵D-蔗糖＋

D-蜜二糖＋

苦杏仁甙＋

注：＋＞99%阳性；－＞99%阴性；（＋）90%－99%阳性；（－）90%－99%阴性。

6结果与报告

综合菌落形态和生化特征，报告每100g（mL）样品中检出或未检出阪崎肠杆菌。

第二法阪崎肠杆菌的计数

7操作步骤

7.1样品的稀释

7.1.1固体和半固体样品：无菌称取样品100g、10g、1g各三份，加入已预热至44℃分别盛有900mL、

90mL、9mLBPW中，轻轻振摇使充分溶解，制成1:10样品匀液，置36℃±1℃培养18h±2h。分别

移取1mL转种于10mLmLST-Vm肉汤，44℃±0.5℃培养24h±2h。

7.1.2液体样品：以无菌吸管分别取样品100mL、10mL、1mL各三份，加入已预热至44℃分别盛

有