GB/T 4789.30-2003 食品卫生微生物学检验 单核细胞增生李斯特氏菌检验

GB/T4789.30-2003

前言

本标准对GB/T4789.30-1994《食品卫生微生物学检验单核细胞增生李斯特氏菌检验》进行

修订。

本标准与GB/T4789.30-1994相比主要修改如下:

—按照GB/T1.1-200。对标准文本的格式和文字进行修改

—修改和规范原标准中的“设备和材料”。

—培养基成分的含量:A.4.1氯化钠5g改为20go

—对6.8小鼠的致病力试验作了修改。

本标准自实施之日起，GB/T4789.30-1994同时废止。

本标准的附录A是规范性附录。

本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。

本标准起草单位:中国疾病预防控制中心营养与食品安全所。

本标准主要起草人:白竟玉、付萍、李志刚、计融。

本标准于1994年首次发布，本次为第一次修订。

GB/T4789.30-2003

食品卫生微生物学检验

单核细胞增生李斯特氏菌检验

范围

本标准规定了单核细胞增生李斯特氏菌的检验方法。

本标准适用于食品和食物中毒样品中单核细胞增生李斯特氏菌的检验。

2规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有

的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究

是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。

GRIT4789.28-2003食品卫生微牛物学检验染色法、培养基和试剂

3设备和材料

3.1冰箱:4℃一一20'C。

3.2恒温培养箱:30℃士1'C,24℃士10C。

3.3恒温水浴锅:46℃士10C。

3.4均质器或灭菌乳钵。

3.5显微镜:lox-looxo

3.6离心机:4000r/mine

3.7架盘药物天平:0g-500g,精度0.5g,

3.8锥形瓶:100mL,500ml-.

3.9灭菌吸管:1mL(具0.01mL刻度),10mL(具0.1mL刻度)。

3.10灭菌平皿:直径90cm,

3.11灭菌试管:16mmX160mm,

3.12离心管:30mmX100mm,

3.13灭菌注射器:1ml。

3.14单核细胞增生李斯特氏菌标准株。

3.15马红球菌。

3.16小白鼠:16g-18g.

4培养基和试荆

4.1含。.6%酵母浸膏的胰酪大豆肉汤(TSB-YE):见第A.1章。

4.2含0.6%酵母浸膏的胰酪大豆琼脂(TSA-YE):见第A.2章。

4.3EB增菌液:见第A.3章

4.4李氏增菌液(LB,,I-B2):见第A.4章。

4.5三糖铁(TSI)琼脂:按GB/T4789.28-2003中4.26,4.270

4.6SIM动力培养基:见第A.5章。

4.7血琼脂:GB/T4789.28-2003中4.6.

GB/T4789.30-2003

4.8改良的McBride(MMA)琼脂:见第A.5章。

4.9硝酸盐培养基:GB/T4789.28-2003中3.17

4.10缓冲葡萄糖蛋白陈水(MR和VP试验用):GB/T4789.28-2003中3.4

4.11糖发酵培养基:GB/T4789.28-2003中3.2

4.12过氧化氢酶试验:GB/T4789.28-2003中4.38

4.131%盐酸丫吮黄溶液(AcriflavineHCll:见第A.4.2.1章。

4.141%蔡吮酮酸钠盐溶液(Naladixicacid):见第A.4.2.1章。

5检验程序

单核细胞增生李斯特氏菌检验程序见图1.

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GB/T4789.30-2003

6操作步骤

6.1样品的收集及处理

无菌取样品25g(mL)放灭菌均质器中加225mLEB和LB增菌液中，充分搅拌成均质。如不能及

时检验，可暂存4℃冰箱。

6.2增菌培养

EB增菌液放30℃士I℃培养48h,I.B，增菌液225mL放30℃士10C培养24h，吸取0.1mL，加人

10ml,LBz增菌液中二次增菌

6.3分离培养

将EB增菌液和LB:二次增菌液分离于选择培养基MMA琼脂平板上，培养30℃士10C48h，挑选

可疑菌落，