GB 4789.35-2016 食品安全国家标准 食品微生物学检验 乳酸菌检验

中华人民共和国国家标准

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GB4789.352016

食品安全国家标准

食品微生物学检验乳酸菌检验

2016-12-23发布2017-06-23实施

中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会

发布

国家食品药品监督管理总局

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GB4789.352016

前言

本标准代替—《食品安全国家标准食品微生物学检验乳酸菌检验》、

GB4789.352010

/—《:》。

进出口食品中乳酸菌检验方法第部分分离与计数方法

SNT1941.120071

—,:

本标准与GB4789.352010相比主要变化如下

———增加了乳酸菌总数计数培养条件的选择及结果说明;

———修改了改良MRS培养基成分;

———修改了平板计数的接种方法和接种量。

Ⅰ

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GB4789.352016

食品安全国家标准

食品微生物学检验乳酸菌检验

1范围

本标准规定了含乳酸菌食品中乳酸菌()的检验方法。

lacticacidbacteria

本标准适用于含活性乳酸菌的食品中乳酸菌的检验。

2术语和定义

2.1

乳酸菌lacticacidbacteria

。()、

一类可发酵糖主要产生大量乳酸的细菌的通称本标准中乳酸菌主要为乳杆菌属Lactobacillus双

歧杆菌属()和嗜热链球菌属()。

BiidobacteriumStretococcus

fp

3设备和材料

,:

除微生物实验室常规灭菌及培养设备外其他设备和材料如下

恒温培养箱:。

3.136℃±1℃

冰箱:。

3.22℃~5℃

、。

3.3均质器及无菌均质袋均质杯或灭菌乳钵

:。

3.4天平感量0.01g

无菌试管:、。

3.518mm×180mm15mm×100mm

:()、()。

无菌吸管具刻度具刻度或微量移液器及吸头

3.61mL0.01mL10mL0.1mL

无菌锥形瓶:、。

3.7500mL250mL

4培养基和试剂

:。

4.1生理盐水见A.1

()培养基及莫匹罗星锂盐()和半胱氨酸盐酸盐(

4.2MRSManRoosaShareLi-MuirocinCsteine

gppy

):。

改良培养基见和

HdrochlorideMRSA.2A.3

y

():。

4.3MC培养基ModifiedChalmers培养基见A.4

:。

4.40.5%蔗糖发酵管见A.5

:。

4.40.5%纤维二糖发酵管见A.5

:。

4.60.5%麦芽糖发酵管见A.5

:。

4.70.5%甘露醇发酵管见A.5

:。

4.80.5%水杨苷发酵管见A.5

:。

4.90.5%山梨醇发酵管见A.5

:。

4.100.5%乳糖发酵管见A.5

1

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GB4789.352016

:。

4.11七叶苷发酵管见A.6

:。

4.12革兰氏染色液见A.7

():。

4.13莫匹罗星锂盐Li-Muirocin化学纯

p

():。

4.14半胱氨酸盐酸盐CsteineHdrochloride纯度>99%

yy

5检验程序

乳酸菌检验程序见图1。

图1乳酸菌检验程序图

6操作步骤

6.1样品制备

6.1.1样品的全部制备过程均应遵循无菌操作程序。

,,

6.1.2冷冻样品可先使其在2℃~5℃条件下解冻时间不超过18h也可在温度不超过45℃的条件

,。

解冻时间不超过15min

:,,

6.1.3固体和半固体食品以无菌操作称取25g样品置于装有225mL生理盐水的无菌均质杯内于

//,;

8000rmin~10000rmin均质1min~2min制成1∶10样品匀液或置于225mL生理盐水的无菌

,。

均质袋中用拍击式均质器拍打1min~2min制成1∶10的样品匀液

:

6.1.4液体样品液体样品应先将其充分摇匀后以无菌吸管吸取样品25mL放入装有225mL生理盐

(),,。

水的无菌锥形瓶瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠中充分振摇制成1∶10的样品匀液

2

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GB4789.352016

6.2步骤

,

用无菌吸管或微量移液器吸取样品匀液沿管壁缓慢注于装有生理盐

6.2.11mL1∶101mL9mL

(),

水的无菌试管中注意吸管尖端不要触及稀释液振摇试管或换用支无菌吸管反复吹打使其混合均

1

,。

匀制成1∶100的样品匀液

,,,

另取无菌吸管或微量移液器吸头按上述操作顺序做倍递增样品匀液每递增稀释

6.2.21mL10

,。

一次即换用次灭菌吸管或吸头

11mL

6.2.3乳酸菌计数

6.2.3.1乳酸菌总数

乳酸菌总数计数培养条件的选择及结果说明见表1。

表1乳酸菌总数计数培养条件的选择及结果说明

样品中所包括乳酸菌菌属培养条件的选择及结果说明

仅包括双歧杆菌属按GB4789.34的规定执行

。

仅包括乳杆菌属按照6.2.3.4操作结果即为乳杆菌属总数

。

仅包括嗜热链球菌按照6.2.3.3操作结果即为嗜热链球菌总数

)